侵染水鬼蕉和花朱顶红的番茄斑萎病毒属病毒的电镜和DAS-ELISA诊断

方琦; 董家红; 丁铭; 尹跃艳; 张丽珍; 李婷婷; 苏晓霞; 李展; 张仲凯; 《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：从昆明市郊区采集到呈同心圆褪绿环斑、褐色枯斑症状的水鬼蕉[Hymenocallis littoraris(Jacq.)Salisb.]和花朱顶红[Hippeastrum vittatum(L’Hér.)Herb.]植株,采用电子显微镜技术和DAS-ELISA进行检测,在水鬼蕉和花朱顶红病叶分离物SGJ-KM和ZDH-KM的粗汁液和超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒粒体存在,该病毒粒子为球形,直径80～85nm;病叶汁液与Tospovirus中的西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)/花生芽坏死病毒(Groundnut bud necrosis virus,GBNV)的复合抗血清呈阳性反应。通过形态学及血清学方法检测表明,侵染水鬼蕉和花朱顶红的病毒分离物SGJ-KM和ZDH-KM为Tospovirus的病毒分离物。

关键词： 水鬼蕉 花朱顶红 粒子形态 番茄斑萎病毒属 DAS-ELISA

烘烤烟丝中残留病毒的检测

方琦; 丁铭; 李婷婷; 董家红; 程晓菲; 张丽珍; 苏晓霞; 张仲凯; 《西南农业学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：应用电镜、DAS-ELISA技术检测烘烤烟丝样品K326-1和K326-2中的病毒。电镜观察到2个样品中均有类似烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的粒子,在K326-2烟丝中还有类似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的病毒粒子存在于细胞壁及细胞质中。2个样品均与TMV抗血清及西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)抗血清呈阳性反应。结果表明经烘烤的烟丝中仍存在病毒。

关键词： 烟丝 烟草花叶病毒 番茄斑萎病毒属病毒

云南香料烟花叶病病原分离物的鉴定

苏晓霞; 李婷婷; 何跃锋; 李光西; 董家红; 丁铭; 方琦; 张丽珍; 李展; 张仲凯; 《西南农业学报 》 2007 CSCD

摘要：从云南保山采集具典型花叶症状的香料烟病株,用病株汁液接种心叶烟,进行单斑分离纯化。电子显微镜观察到杆状病毒粒体(18nm×300nm),三抗体夹心酶联免疫吸附(TAS-ELISA)检测与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)抗血清呈阳性反应;用TMV外壳蛋白(CP)基因特异性引物进行RT-PCR扩增,克隆,经序列测定分析,侵染云南保山香料烟的病原分离物CP基因含480个核苷酸,编码159个氨基酸,通过核苷酸和氨基酸序列分析,与TMV-152的相似性最高,核苷酸序列的相似性为98.8%,推导编码氨基酸相似性达到100.0%,亲缘关系最近。根据这些特性,引起云南保山香料烟花叶病的病原分离物是烟草花叶病毒的一个分离物。

关键词： 香料烟 烟草 花叶病毒 鉴定

水稻矮缩病毒昆明分离物抗血清制备及免疫捕捉PCR检测

彭潞波; 李婷婷; 魏春红; 方琦; 董家红; 张丽珍; 苏晓霞; 丁铭; 张仲凯; 李毅; 《Virologica Sinica 》 2006 CSCD

关键词： 水稻矮缩病毒 抗血清 间接ELISA 免疫捕捉PCR

马铃薯A病毒云南分离物外壳蛋白基因的克隆与序列分析

丁铭; 方琦; 张丽珍; 李婷婷; 董家红; 张仲凯; 《西南农业学报 》 2006 CSCD

摘要：根据马铃薯病毒A(Potato virusA,PVA)外壳蛋白(CP)基因序列设计合成的一对引物,以带病毒植株总RNA为模板,RT-PCR扩增得到长约800 bp的目的片段。将目的片段克隆至pGEM-T Easy载体并进行了序列测定,测得全长为807 bp的PVA CP基因。测序结果与PVA其他分离物CP基因序列比较,其氨基酸同源性最高可达98.5%。根据GenBank中PVA CP氨基酸序列建立了病毒的系统进化树并对PVA不同分离物CP氨基酸序列差异性进行了分析。

关键词： 马铃薯A病毒 云南分离物 外壳蛋白基因 序列分析

马铃薯卷叶病毒云南分离物外壳蛋白基因的克隆与序列分析

丁铭; 方琦; 李婷婷; 张丽珍; 董家红; 李展; 张仲凯; 《植物病理学报 》 2006 北大核心 CSCD

云南甘蔗花叶病原的电镜诊断

方琦; 李文凤; 丁铭; 董家红; 李婷婷; 张丽珍; 苏晓霞; 李展; 张仲凯; 《电子显微学报 》 2005