科研产出
甘蓝型油菜Fad2基因的RNA干扰及无筛选标记高油酸含量转基因油菜新种质的获得
《植物生理与分子生物学学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：利用已获得的油菜种子贮存蛋白——十字花科蛋白(cruciferin)基因的启动子和终止子,构建了无选择标记基因且同时具有正义及反义结构的油酰去饱和酶基因(Fad2)种子特异表达RNAi载体,并通过农杆菌介导的转化,获得了只含有油菜原有基因且Fad2基因表达受抑制的转基因植株。RT-PCR分析结果表明,在油酸含量达到83.9%的转基因植株中未检测到在非转基因植株中普遍存在的Fad2基因转录mRNA——一种典型的RNA干扰现象。通过对植株生长发育状态的观察比较,该高油酸含量转基因株系并未表现出双突变体中由于Fad2基因的失活所引起的植株抗寒能力差、发育迟缓、花蕾死亡、结实率低等不利农艺学性状。
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EMS对甘蓝型油菜离体小孢子胚胎发生能力的影响
《西南农业学报 》 2004 CSCD
摘要：EMS(甲基磺酸乙酯)是烈性致癌物质,对育种者而言,它又是很好的诱变剂。本试验用不同的EMS浓度(0,1 0,1 5,2 0,2 5,3 0mmol/L)和不同时间(12,24,36h)处理甘蓝型油菜的离体小孢子,通过统计每花蕾产胚的数量,观察到随着EMS浓度的增高和处理时间的延长,每花蕾产胚的数量减少,即小孢子的胚胎发生能力减弱。研究得出当EMS浓度为2 5mmol/L,处理时间为24h,每花蕾产胚的数量接近对照产胚数量的一半,根据半致死剂量(LC50)原则,这一浓度和时间对EMS诱变甘蓝型油菜离体小孢子具有重要的应用价值。
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Δ12-脂肪酸去饱和酶基因(fad2)突变对油菜叶片表面结构和透性的影响
《植物生理与分子生物学学报 》 2003 北大核心 CSCD
摘要：首次报告了利用简单的叶片氧化实验可区别油菜正常株系及具有高油酸 (低亚油酸 )性状的fad2基因 (Δ12 fattyaciddesaturasegene)突变体。突变体叶片内的有色或具还原性的物质能被次氯酸钠及硝酸银溶液在 5～ 10min漂白或氧化 ,正常株系及突变体的fad2基因功能补偿转化体的叶片被漂白的时间需要 2 4～ 4 8h。通过扫描电镜观察揭示了突变体与正常株系之间叶片表面蜡颗粒沉积均匀性上的差异。实验结果表明 :fad2基因的突变改变了叶片表面蜡的沉积结构并增大了叶片表层的溶液渗透性 ,其原因可能与木质(cutan)的合成受抑制相关。
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用EMS诱变和小孢子培养快速获得甘蓝型油菜高油酸种质材料的研究
《西南农业学报 》 2003 CSCD
摘要：用EMS(甲基磺酸乙酯)溶液诱变甘蓝型油菜的小孢子,离心去除EMS,用秋水仙碱溶液对诱变后的小孢子进行染色体加倍,再离心去除秋水仙碱,用NLN 13培养基进行小孢子培养。当小孢子发育成完整的试管植株后,用幼叶氧化法定性、快速地筛选高油酸突变材料。筛选获得的材料经移栽定植,用气相色谱法精确地分析其种子的脂肪酸组成,得到了一份油酸含量为80 3396%的高油酸突变材料。本研究提高了油酸改良工作中诱变频率,降低测试分析费用。
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菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养
《西南农业大学学报 》 2002 北大核心 CSCD
摘要：探讨菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的规律 ,并用正交设计法对影响细胞悬浮培养的主要因素如温度、接种量、生长素 2 ,4 -D、蔗糖含量进行分析 ,得出菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的优化条件 :温度 2 0℃、接种量 0 .2g·30ml-1、激素 2 ,4 -D 0 .2mg·L-1、蔗糖含量 2 .0 %。
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