根肿病菌核糖体基因ITS区段的克隆测序及其在检测中的应用

杨佩文; 李家瑞; 杨勤忠; 曾莉; 王群; 《云南农业大学学报 》 2003 CSCD

摘要：应用真菌核糖体基因ITS区段通用引物ITS1和ITS4,对十字花科蔬菜根肿病菌(Plasmodiophorabrassicae)rDNA进行PCR扩增,并将扩增到的目的片段克隆到pGEM-T载体上。对重组克隆进行测序和碱基编码结构特点分析,结果表明:十字花科蔬菜根肿病菌ITS1区长141bp,5 8S区长160bp,ITS2区长187bp,rDNA总长为488bp.根据此序列设计一对根肿病菌特异性寡聚核苷酸引物(前引物:5'AGGTGAACCTGCGGAAGGAT3'和后引物:5'TTCAGCGGGTAATCCTACCT3'),应用聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)技术,对分离自十字花科蔬菜(白菜、青菜、甘蓝、芥蓝、花椰菜等)根肿病菌全基因组DNA进行特异性扩增试验。试验结果表明,该对引物能从十字花科根肿病菌全基因组DNA中扩增到约500bp长度的分子片段,而对照菌株和健康对照则无扩增产物。该实验结果对有效追踪根肿病菌在田间的发生动态监测和预测预报提供了重要的信息和手段。

关键词： 十字花科蔬菜根肿病菌 ITS(Internaltranscribedspacer)区段 基因克隆和测序 基因检测

十字花科蔬菜根肿病菌休眠孢子的分离与检测

杨佩文; 李家瑞; 杨勤忠; 王群; 《云南农业大学学报 》 2002 CSCD

摘要：在常规分离方法的基础上 ,对分离自根肿组织和土壤中休眠孢子粗提液用 5 0 %蔗糖溶液进行悬浮 ,能成功地提取到根肿病菌的休眠孢子 ,可用于病原菌的繁殖、长期保存、DNA的提取及其它植物病理学研究 ,并能在 6 0 0倍显微镜下清晰检测得到

关键词： 十字花科蔬菜 根肿病菌 分离 检测

十字花科蔬菜根肿病菌的PCR快速检测

杨佩文; 曾莉; 李家瑞; 杨勤忠; 王群; 《云南农业大学学报 》 2002 CSCD

十字花科蔬菜根肿病研究进展

杨佩文; 李家瑞; 杨勤忠; 王群; 曾莉; 梁谊; 《植物保护 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：概述了十字花科蔬菜根肿病菌分离培养、病原菌检测、病菌致病性分化、品种抗病性和病害综合治理等方面的研究进展 ,并对其研究前景进行了讨论

关键词： 十字花科蔬菜根肿病 致病性分化 品种抗病性 综合治理

云南省部分稻种资源稻瘟病抗性评价及基因分析

王群; 杨佩文; 杨勤忠; 郑凤萍; 李家瑞; 《云南农业大学学报 》 2001 CSCD

摘要：对 36 6份地方品种进行了稻瘟病叶瘟鉴定及评价。结果表明 ,陆稻地方品种中高抗的品种最多 ,占 36 7% ;其次是籼稻地方品种 ,占 6 3% ;粳稻最少 ,仅占 2 2 %。对 16个高抗稻瘟病的陆稻地方品种进行基因分析 ,发现 9个品种对所测试菌株受 2对基因控制 ,7个品种对所测试菌株受 3对基因控制。这些陆稻地方品种是发掘和定位新的抗稻瘟病基因以及抗性育种的重要素材和抗源。

关键词： 地方品种 稻瘟病抗性鉴定 基因分析

抗稻瘟病基因在粳型杂交稻育种中的利用

杨佩文; 王群; 张树华; 洪汝科; 许红云; 杨勤忠; 李家瑞; 《云南农业大学学报 》 2001 CSCD

摘要：利用常规回交并结合抗病基因同步跟踪鉴定的手段 ,把在云南生产上有利用价值的 3个抗稻瘟病基因Piz ,Piz -t,Pi2 5 (t)导入到粳型杂交稻育种材料南 2 9恢复系、H14中 ,获得了BC4F3 代抗病基因纯合单株 ,通过测配试验 ,结果表明这些恢复系具有强的恢复能力

关键词： 稻瘟病 抗病基因 杂交稻 育种

水稻抗病基因同源序列的克隆及测序分析

杨勤忠; 杨佩文; 王群; 刘继梅; 鄢波; 李家瑞; 黄兴奇; 《中国水稻科学 》 2001 北大核心 CSCD

摘要：根据已知的 NBS- L RR类及丝 /苏氨酸蛋白激酶类抗病基因结构中氨基酸的保守区域 ,设计了两组简并引物用于扩增广谱抗稻瘟病品种云系 2号中的抗病基因同源序列。结果一共获得 11类的 NBS- L RR类抗病基因同源片段及 16类的丝 /苏氨酸蛋白激酶类抗病基因同源片段。所有 11类的抗病基因同源系列均含有 NBS- L RR类抗病基因的保守序列 ,如 P-loop、Kinase 2、Kinase 3a以及跨膜区域等。所有 16类的蛋白激酶的序列均含有丝 /苏氨酸蛋白激酶所共有的催化区 (共有氨基酸序列 :DL KPEN)、 (共有氨基酸序列 :GT/ SXXYXAPE)以及蛋白激酶的其他催化区。两条 NBS- L RR类的抗病基因同源片段 YR1、YR12分别与抗病基因 I2 C- 2及 Xa1氨基酸同源性很高 (>5 0 % )。7条丝 /苏氨酸蛋白激酶类的抗病基因同源片段与已克隆的 Xa2 1、Pto、L r10等抗病基因的氨基酸序列超过 6 0 %的相同以及 76 %～ 78%的氨基酸类似

关键词： 水稻 核酸结合位点 丝/苏氨酸蛋白激酶 稻瘟病 抗病基因 同源序列

紫苏的综合开发利用

杨佩文; 杨勤忠; 郑凤萍; 赵志坚; 王群; 李家瑞; 《云南农业科技 》 1999