科研产出
家蚕素斑品种菁松的茶斑限性定向转育
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要:为在家蚕现行素斑品种菁松的幼虫发育早期进行雌雄性别鉴别,实现雌雄分养分缫差异化利用目的,用普斑限性品系云蚕7A的雌与茶斑品系Cb的雄杂交后,再分别与现行素斑品系菁松A、菁松B杂交,其后代连续数次回交素斑亲本后自交,结合分类选择进行个体和蛾区选择淘汰,将云蚕7A的普斑限性基因和Cb的茶斑基因转入现行素斑品种菁松中,定向转育得到菁A茶限和菁B茶限。结果表明:转育过程中,幼虫斑纹分化成颜色与形状易于分辨的茶斑与非茶斑2种类型,转育得到的菁A茶限和菁B茶限幼虫在3龄初期就会呈现茶斑颜色深浅明显不同的分化,能准确分辨雌雄,其虫蛹率分别为96.91%和96.40%,全茧量分别为1.62 g和1.56 g,茧层率分别为23.78%和23.26%,经济性状与其轮回亲本的差异较小,表现出健康好养、茧质优良等特性。研究结果可为创建特殊性状的育种材料、差异化利用雌雄蚕,以及降低雄蚕种繁育成本奠定基础。
25份抗BmNPV家蚕育种素材对人工饲料育的适应性
《中国蚕业 》 2024
摘要:为选育出对人工饲料育适应性优良的抗BmNPV家蚕品种,对云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所保存的25份抗BmNPV家蚕育种素材进行了人工饲料育适应性研究,调查分析了这些家蚕育种素材24 h疏毛率、2眠蚕体质量及3龄蚕存活率。结果表明:供试的25份家蚕育种素材中,24 h疏毛率在90.10%~100%之间的有18份,在80.10%~90.00%之间的有5份;人工饲料育2眠蚕体质量多数低于桑叶育,但是其中有5份高于桑叶育,明8C高出桑叶育43.08%;3龄蚕存活率在90.10%~100%之间的有6份,在80.10%~90.00%之间的有13份,在60.10%~80.00%之间的有6份;24 h疏毛率在80.00%以上且与3龄蚕存活率差距在10个百分点以内的有11份,对该11份家蚕育种素材的24 h疏毛率和3龄蚕存活率相关性分析结果表明,它们的相关系数为0.634,呈显著相关。通过本试验,筛选出24 h疏毛率高和3龄蚕存活率高的家蚕育种素材,为选育出对人工饲料育具有良好适应性的抗BmNPV家蚕新品种打下基础。
关键词: 家蚕 抗BmNPV 育种素材 人工饲料 疏毛率 3龄蚕存活率
溴虫腈胁迫对家蚕经济性状与繁殖力的影响
《贵州农业科学 》 2023 北大核心
摘要:【目的】探明溴虫腈胁迫对家蚕经济性状和繁殖力的影响,为溴虫腈在蚕桑生产上的合理应用提供科学依据。【方法】以2个家蚕品系(p50和QBA)为研究对象,采用100 mg/L溴虫腈处理新鲜桑叶并晾干叶面水分后连续饲喂其5龄幼蚕1 d(处理1)、3 d(处理2)、5 d(处理3)、7 d(处理4)至上簇结茧,以相同时间饲喂等量清水处理桑叶为对照(CK),研究其5龄幼蚕存活率、结茧率、化蛹率、全茧量、茧层量、茧层率和蛹体重,以及雌雄蛾羽化率、单雌蛾产卵数和受精卵率的变化。【结果】不同处理2个家蚕品系5龄幼蚕存活率、结茧率和化蛹率分别为91.11%~98.89%/94.44%~98.89%、80.42%~100.00%/90.64%~100.00%和57.60%~100.00%/78.00%~100.00%;随着饲喂时间的延长,p50和QBA雌/雄蚕各处理的全茧量、茧层量和蛹体重呈下降趋势,雌蚕的全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重分别为0.84~1.29 g/1.31~1.69 g、0.09~0.15 g/0.26~0.33 g、10.70%~11.66%/19.26%~19.97%和0.74~1.14 g/1.05~1.36 g,雄蚕的全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重分别为0.64~0.97 g/1.09~1.35 g、0.09~0.14 g/0.26~0.30 g、13.49%~14.86%/22.50%~24.11%和0.55~0.83 g/0.83~1.05 g, QBA雌/雄蚕的全茧量、茧层量和蛹体重均大于p50;2个家蚕品系的雌蛾和雄蛾羽化率随着饲喂时间增加呈下降趋势,相同处理雌蛾羽化率低于雄蛾,在已羽化的各处理中,p50和QBA的雌蛾羽化率分别为59.84%~98.15%和40.67%~97.22%,均以CK最高,分别以处理2和处理3最低,显著和极显著低于CK;雄蛾羽化率分别为67.22%~100.00%和28.25%~98.15%,均以CK最高,分别以处理3和处理4最低,显著和极显著低于CK。在已羽化的各处理中,p50和QBA各处理单雌蛾平均产卵数分别为304~430粒和298~545粒,均以CK最高,分别以处理2和处理3最低,显著和极显著低于CK;各处理受精卵率分别为95.30%~96.16%和88.14%~95.08%,与CK差异均不显著。【结论】溴虫腈对家蚕具有一定的慢性累积毒性,且溴虫腈胁迫对家蚕的经济性状和繁殖力具有明显的不良影响。
龟纹瓢虫对桑蓟马的捕食作用及两者在桑树上的分布
《植物保护 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为了明确桑蓟马Pseudodendrothrips mori和龟纹瓢虫Propylea japonica在桑树上不同部位的分布情况,及龟纹瓢虫对桑蓟马的捕食作用和防治潜力,本试验采用五点取样法,使用叶片采集法对桑树上的桑蓟马和龟纹瓢虫分布进行了调查,在室内开展了龟纹瓢虫2龄、3龄幼虫对桑蓟马2龄若虫和成虫的捕食能力试验.结果表明,桑蓟马在桑叶背面的种群数量更高,主要分布在第2至第5叶位上.龟纹瓢虫对桑蓟马若虫和成虫的捕食作用符合Holling Ⅱ型功能反应模型.龟纹瓢虫3龄幼虫对桑蓟马的控制能力大于2龄幼虫,2龄幼虫对桑蓟马2龄若虫和成虫的最大理论捕食量分别为91.74头和55.56头,3龄幼虫分别为344.83头和196.08头.搜寻效应随猎物密度升高而下降,龟纹瓢虫对桑蓟马的捕食数量受自身密度的影响.龟纹瓢虫在室内对桑蓟马的2龄若虫和成虫具有较强的捕食潜力,且其在田间具有分布,可以作为桑蓟马生物防治的潜在材料.
桑蓟马种群动态及异色瓢虫对其的捕食功能反应
《蚕业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为明确桑蓟马在桑树上的种群活动情况以及异色瓢虫对桑蓟马的捕食能力。采用5点取样,使用盘拍法对桑树上的桑蓟马种群动态进行调查,在室内选取异色瓢虫2龄幼虫和3龄幼虫对桑蓟马2龄若虫和成虫开展捕食能力试验。结果表明,桑蓟马发生高峰期与桑树生长旺盛期一致,即在4月下旬至5月桑蓟马数量迅速增加。桑蓟马若虫数量在发生早期、主要发生期和发生晚期,均要高于桑蓟马成虫,若虫最高数量为103.49头/枝。异色瓢虫对桑蓟马若虫和成虫的捕食作用符合HollingⅡ型功能反应模型,桑蓟马相同龄期时,异色瓢虫3龄幼虫的控制能力大于2龄幼虫,异色瓢虫3龄幼虫对桑蓟马2龄若虫的捕食上限最高为416.67头。异色瓢虫2龄幼虫对桑蓟马成虫的捕食上限最低为104.17头,异色瓢虫对桑蓟马的捕食数量受自身密度的影响。异色瓢虫对桑蓟马具有较强的捕食潜力,并且对桑蓟马若虫的捕食数量高于对桑蓟马成虫的捕食数量。本研究可为采用异色瓢虫对桑蓟马进行生物防治的田间应用提供理论依据。
不同温度和饥饿胁迫下琥珀蚕AaHsp90基因的表达特征
《河南农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:为了探究高温、低温和饥饿胁迫对琥珀蚕热激蛋白AaHsp90基因表达水平的影响,揭示琥珀蚕适应环境的分子机制,对5龄第3天琥珀蚕幼虫分别进行38℃高温、4℃低温和饥饿胁迫处理,以26℃正常饲养组为对照,采用实时荧光定量PCR检测分析中肠、脂肪体和血淋巴AaHsp90基因的相对表达量变化情况。结果表明,在测定的时间范围内,38℃高温处理后,中肠、脂肪体和血淋AaHsp90基因的表达量均呈现先明显增加,后随着处理时间的延长急剧减弱的趋势。4℃低温处理对琥珀蚕幼虫中肠、脂肪体和血淋巴Aahsp90基因的表达有一定的抑制作用。饥饿处理组中,琥珀蚕血淋巴、脂肪体和中肠AaHsp90基因在饥饿12 h和18 h呈现上调表达趋势,而在饥饿24 h时,AaHsp90基因的表达量急剧降低。综上可知,高温和饥饿胁迫能诱导琥珀蚕Aahsp90基因的表达,而低温胁迫主要抑制AaHsp90基因的表达,提示AaHsp90蛋白在琥珀蚕幼虫适应高温和饥饿胁迫的过程中发挥了重要作用。
关键词: 琥珀蚕 热激蛋白90 温度胁迫 饥饿胁迫 表达特征
秋季桑园喷水对保幼激素类农药影响家蚕原种繁育的效果
《浙江农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:保幼激素类农药会造成家蚕(Bombyx mori)慢性中毒,使蚕种繁育蒙受经济损失.为了解桑园喷水能否降低保幼激素类农药对原种繁育的影响.从原原种出库开始至上蔟结束,每天下午对桑树喷水30 min,以喷湿全株、桑叶全部向下滴水为宜.收蚁后,采摘喷水桑叶饲喂的12个品系的原原种,调查饲喂喷水桑叶对家蚕体重、龄期经过、结茧率、交配率与产卵等重要性状的影响.结果表明:饲喂经喷水处理的桑叶,对12个品系的家蚕原原种龄期发育经过、健蛹率、茧质、交配率、卵质成绩产生了不同程度的影响,其中,对卵质成绩和健蛹率成绩影响较显著.对12个品系原原种的影响程度为:云夏4 A>云夏4 B>云抗1号中A>云抗1号中B>云抗1号日B>皓月A>云夏3B>皓月B>云抗1号日A>云夏3A>菁松B>菁松A.因此,在有保幼激素类农药污染的蚕区繁育原种,选择雨水较多的夏季繁育,秋季桑园采取喷水可以降低保幼激素类农药对原种繁育的风险,提高原种繁育系数.
关键词: 喷水;家蚕;农药污染;桑树;交配率;卵质
琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析
《昆虫学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:[目的]本研究旨在克隆琥珀蚕Antheraea assama丝腺转录因子基因AaSGF-1,分析其序列特征及表达模式并制备多克隆抗体,为探讨该基因的生理功能奠定基础.[方法]采用RT-PCR和RACE技术从琥珀蚕丝腺中克隆AaSGF-1的cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用qPCR检测AaSGF-1在琥珀蚕5龄第4天幼虫不同组织(头、中肠、脂肪体、丝腺、血液、表皮)中的表达模式;构建原核表达质粒载体,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达AaSGF-1,利用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔子,获得高效的抗体.利用免疫荧光技术检测AaSGF-1在琥珀蚕蚁蚕丝腺和表皮及4龄幼虫丝腺中的表达情况.[结果]克隆了琥珀蚕AaSGF-1的cDNA序列(GenBank登录号:MK889510.1),开放阅读框(ORF)序列长1 050 bp,编码349个氨基酸残基,预测蛋白分子质量为38.8 kD,理论等电点(pI)为8.74.qPCR检测结果显示AaSGF-1在琥珀蚕5龄幼虫丝腺组织尤其是后部丝腺中高量表达,而在其他组织中几乎不表达.免疫荧光结果表明AaSGF-1在蚁蚕及4龄幼虫的丝腺中表达.[结论]本研究原核表达了琥珀蚕AaSGF-1,制备了多克隆抗体,证实了AaSGF-1在琥珀蚕幼虫的丝腺中高表达,为进一步研究该基因在琥珀蚕丝腺发育及丝蛋白合成中的作用奠定了基础.
关键词: 琥珀蚕 丝腺转录因子 基因克隆 原核表达 多克隆抗体 组织表达谱
家蚕β-呋喃果糖苷酶基因BmSuc1表达特征及其对激素的响应
《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:【目的】探究BmSuc1基因在家蚕不同组织及不同时期的表达特征及经昆虫激素处理后的表达变化规律,明确昆虫激素对BmSuc1基因的调控作用,为深入解析BmSuc1基因的功能及其表达调控机制提供参考依据。【方法】利用实时荧光定量PCR检测BmSuc1基因在家蚕发育过程中不同时期和不同组织及外源激素处理后的表达特征,并通过双链RNA(dsRNA)干扰试验检测家蚕20-羟基蜕皮素(20E)受体基因(USP)干扰效果及BmSuc1基因的表达变化。【结果】BmSuc1基因在家蚕中肠中的相对表达量最高,其次是丝腺、表皮和血淋巴,在其他组织中的相对表达量很低或几乎不表达;BmSuc1基因呈脉冲型的表达模式,在家蚕每个龄期的将眠时、五龄后期(上簇前)及预蛹时的相对表达量较高。利用外源激素[20E和保幼激素(JH)]分别处理五龄第2 d发育良好的家蚕,发现经20E处理后12和18 h,BmSuc1基因相对表达量极显著高于注射0.1%二甲基亚砜(DMSO)的对照组(Ρ<0.01,下同),但在测定时间范围内JH处理组的BmSuc1基因相对表达量与对照组间无显著差异(Ρ>0.05)。以体外转录合成USP基因的dsRNA注射五龄第3 d家蚕,注射后24和36 h,USP基因相对表达量极显著下调,即dsRNA干扰成功。利用RNAi技术干扰USP基因能阻断20E信号转导,致使BmSuc1基因表达受抑制,其相对表达量在干扰USP基因后24和36 h显著下调(Ρ<0.05)。【结论】BmSuc1基因主要在家蚕蜕皮和变态时高表达,暗示其可能参与家蚕的变态发育过程。添加外源20E可诱导BmSuc1基因转录,而阻断20E信号转导途径会抑制BmSuc1基因表达,即BmSuc1基因作为20E信号转导通路中的下游靶基因,直接或间接受到20E信号调控。
关键词: 家蚕 β-呋喃果糖苷酶 BmSuc1基因 20-羟基蜕皮素 保幼激素 表达特征
琥珀蚕孵化酶基因AaHE的克隆及启动子活性分析
《昆虫学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要:【目的】琥珀蚕Antheraea assama具有典型的野蚕特征,蚕卵孵化不齐,严重影响琥珀蚕的室内规模化饲养。本研究旨在探究对琥珀蚕卵孵化起关键作用的孵化酶(hatching enzyme)基因及其启动子序列特征,为进一步选择合适的抑制剂或促进剂调节琥珀蚕卵的孵化奠定基础。【方法】采用RACE技术克隆琥珀蚕孵化酶基因的cDNA全长序列,对基因序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR检测琥珀蚕孵化酶基因在琥珀蚕不同发育天数卵中及5龄第3和4天幼虫不同组织(丝腺、马氏管、头、中肠、脂肪体、表皮、血液、精巢和卵巢)中的表达情况;采用染色体步移克隆琥珀蚕孵化酶基因的启动子序列,构建昆虫细胞重组表达载体转染家蚕Bombyx mori BmN细胞,检测琥珀蚕孵化酶基因启动子活性。【结果】获得了琥珀蚕孵化酶基因AaHE(GenBank登录号:KT336227.1)全长cDNA序列,长993 bp,编码294个氨基酸,预测蛋白质分子质量为33.7 kD,理论等电点为5.17。AaHE氨基酸序列含有一个信号肽和一个ZnMc结构域,AaHE是一种含有HExxH锌结合位点的锌依赖性蛋白水解酶,该类酶既是肽酶,同时又是一种消化酶。AaHE在琥珀蚕孵化前的卵及5龄幼虫中肠中特异性高表达,分别与AaHE的肽酶和消化酶的属性相吻合。AaHE启动子核心区存在多个转录因子结合位点,这可能与转录因子参与调节AaHE的表达有关。启动子活性分析表明,AaHE启动子在家蚕BmN细胞中能够启动EGFP基因的表达,具有明显的启动子活性。【结论】AaHE是锌依赖性蛋白水解酶,其启动子核心区存在多个转录因子结合位点。本研究为选择合适的抑制剂或促进剂调节琥珀蚕卵的孵化率提供了参考。
关键词: 琥珀蚕 孵化酶 RACE 表达谱 启动子活性 BmN细胞