科研产出
农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化甘蓝的研究
《云南植物研究 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：为获得抗旱和耐盐性提高的甘蓝植株,通过农杆菌介导法将来自菠菜的甜菜碱醛脱氢酶(Betaine Aldehyde Dehydrogenase,BADH)基因导入甘蓝品系03079,并采用正交设计优化影响转化效率的参数,建立了甘蓝高效转化体系,即以侵染液为AA液体培养基、乙酰丁香酮200μmolL-1、侵染时间20min、共培养天数2d为最佳转化参数,在该条件下转化率可达54.26%。转基因甘蓝植株经PCR检测初步说明BADH基因已导入甘蓝中,Southern杂交证明BADH基因已稳定整合到甘蓝基因组中。甜菜碱脱氢酶活性测定结果表明,经过聚乙二醇(PEG)、NaCl和干旱处理的转基因甘蓝植株的BADH酶的平均比活力范围在2.1Umg-1～3.6Umg-1之间,不同处理的转基因株系酶比活力显著高于相应的未转基因株系。膜的相对电导率测定结果说明,经过PEG、NaCl和干旱处理的转基因植株平均相对电导率在16.2%～32.6%之间,耐逆境胁迫处理后的绝大多数转基因株系相对电导率显著低于相应对照。多数转BADH基因甘蓝植株在干旱、盐胁迫和PEG胁迫条件下生长势强于未转基因植株,表现为大多数转基因株系株高增幅显著高于对照,说明BADH基因的导入能提高转基因甘蓝植株的抗旱和耐盐性。我们获得的抗旱和耐盐能力明显提高的转基因甘蓝植株,可作为培育耐盐、抗旱甘蓝品种的种质材料。
关键词： 甘蓝 农杆菌介导法 BADH基因 抗旱 耐盐 转基因植株
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提高农杆菌介导法将PinⅡ抗虫基因导入滇型水稻的转化效率
《分子植物育种 》 2004 CSCD
摘要：该文对滇型水稻品种玉优一号、HT-7的愈伤组织诱导、基因转化及植株再生进行了研究.通过实验,将质粒pCAMBI1300上带有的PinⅡ抗虫基因导入水稻愈伤组织细胞中,获得了一批Hyg抗性植株.185株抗性苗经过PCR检测和叶片对潮霉素的抗性试验,证明其中有59株为转基因阳性植株.结果显示,受体、农杆菌状态以及共培养方式等是影响基因转化效率的关键因素;以叶片对潮霉素的抗性作为转基因植株的快速筛选是可行的,大大提高了检测效率.
关键词： 农杆菌介导法 PinⅡ抗虫基因 滇型水稻 转基因 共培养
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反义ACC合成酶基因导入番茄的研究
《云南大学学报(自然科学版) 》 2002 CSCD
摘要：采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPTII的表达载体 pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星 10 2、美国大红 10 8、美国大红王、大红II号等中 .经过卡那霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,其中有 3株PCR检测为阳性 .实验证明 ,不同激素配比对番茄子叶不定芽的诱导有一定影响 ,适宜的农杆菌侵染时间和浓度是番茄基因转化成功与否的关键 ,延迟选择有利于番茄基因转化细胞的生长
关键词： 农杆菌介导法 番茄 反义ACC合成酶基因 延迟选择
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