科研产出
香石竹斑驳病毒单克隆抗体的制备及检测应用
《植物病理学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:用香石竹斑驳病毒(CarMV)免疫的BALB/c鼠脾细胞与Sp2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得5株能稳定传代且分泌抗CarMV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞,并分别制备它们的单克隆抗体腹水。5株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,其中3G1、1B9、2A9和2F8的抗体类型及亚类均为IgG1,而2F2为IgG3。W estern-b lot分析表明,5株单克隆抗体均与CarMV 38 kD的外壳蛋白亚基有特异性反应。利用2A9单抗建立的抗原包被的间接ELISA(ACP-ELISA)检测CarMV方法,病叶1∶800倍稀释、提纯CarMV病毒浓度为1 ng/mL(绝对检测量为0.1 ng)时仍能检测到病毒。利用ACP-ELISA对田间香石竹样品的检测表明,CarMV在香石竹上发病很普遍。
香蕉束顶病毒单克隆抗体的制备及其应用
《西南农业学报 》 1992
摘要:用纯化的香蕉束顶病毒(BBTV)抗原免疫BALB/C小鼠。取脾脏细胞与骨髓瘤NS-1细胞融合。经HAT培养液选择性培养,间接ELISA方法筛选阳性孔。阳性杂交瘤用有限稀释法克隆,间接ELISA法复筛,最后获得201E_3、302C_4两株稳定分泌抗BBTV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。其免疫球蛋白亚类为IgM。纯化后的腹水抗体,用间接ELISA和斑点法(DIA)检测了采自云南河口、个旧和澳大利亚的BBTV病样样品,表现出特异性反应。最高效价达1:64000,培养上清液效价为1:16。经3个月连续培养,仍能稳定分泌抗BBTV McAb.结果表明,已建立了稳定分泌抗香蕉束顶病毒特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。制备的McAb能应用于香蕉束顶病的诊断和病毒的研究。
应用单克隆抗体检测水稻细菌性条斑病菌的效果
《西南农业学报 》 1992
摘要:水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)是我国南方稻区危害水稻的重要病原物之一,为国内植物检疫对象。我国学者谢关林等人曾进行过对该病菌的免疫放射法检测研究,取得较好结果。但由于标记用的同位素价格贵、衰变快,且需要复杂的测定仪器,故推广应用受到了一定限制。笔者等在研制出了针对水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体的基础上,进行了间接酶联免疫吸附法(以下简称“间接ELISA法”)和间接免疫萤光法(以下简称“间接IFA法”)检测水稻种子是否携带细菌性条斑病菌原的研究,以期找出一条简易、有效的检测方法,现已取得较好结果。
关键词: 水稻细菌性条斑病菌 间接免疫荧光法 间接ELISA法 单克隆抗体
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