百合PlAMV和LMoV双重RT-PCR检测体系的建立

王丽花; 杨秀梅; 何晓琴; 张艺萍; 段青; 杨舒淇; 苏艳; 《农业生物技术学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus, PlAMV)和百合斑驳病毒(Lily mottle virus, LMoV)是目前对我国百合(Lilium spp.)产业危害最严重的2种病毒。为建立上述2种病毒的快速高效检测体系，本研究首先提取百合感病植株总RNA，经逆转录获得cDNA，后以cDNA为模板开展双重同步检测体系优化，并对其特异性和灵敏度等进行检测。结果表明，建立的双重同步检测体系对PlAMV和LMoV的特异性扩增片段大小分别为910和521 bp，对其他常见病毒均无扩增，表明所建立方法特异性强；PlAMV和LMoV的最低检出限分别为967.5 fg和59.0 pg，相比于单基因RT-PCR检测的最低检出限(PlAMV 19.35fg, LMoV 11.8 pg)，灵敏度分别降低了50倍和5倍；扩增产物测序片段与不同来源的19个PlAMV分离物和21个LMoV分离物开展BLAST序列分析显示，PlAMV的相似性为86.71%～99.40%,LMoV的相似性为94.75%～99.49%。利用双重同步检测体系对19个田间样品进行检测应用，结果显示，19个样品中有3个样品同时携带PlAMV和LMoV,2个样品携带PlAMV,4个样品携带LMoV，其余10个样品未检出，该结果与基因芯片法检测结果一致。综上所述，本研究所建立的检测体系可同时高效检测PlAMV和LMoV2种病毒，结果可靠，应用前景广阔。

关键词： 百合 双重RT-PCR 车前草花叶病毒(PlAMV) 百合斑驳病毒(LMoV)