科研产出
云南疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME207表达载体构建及遗传转化
《农业与技术 》 2015
摘要：本文验证ME207对白叶枯病的抗性,本研究根据受白叶枯病诱导的疣粒野生稻差减文库中的EST序列设计引物,PCR扩增获得ME207基因全长,构建含有ME207基因的高效表达载体p CAMBIA1303-ME207,对转基因植株接种白叶枯病菌Y8,在苗期和孕穗期分别对其抗性进行鉴定,发现无论是在苗期还是在孕穗期,转基因水稻比对照水稻具有明显的白叶枯病抗性。该结果进一步表明ME207对白叶枯病具有一定的抗性,为揭示云南疣粒野生稻高抗白叶枯病分子机制奠定基础,为将来培育新的抗病水稻品种提供资源。
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农杆菌介导的Bt基因转化马铃薯的研究
《云南大学学报(自然科学版) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：马铃薯块茎蛾的危害极为严重,通过植物基因工程将Bt基因的Cry1Ab类型导入马铃薯,以期获得抗虫性提高的马铃薯基因工程植株.以马铃薯品种‘会-2’为受体材料,对影响转化效率的因素进行了优化,结果表明:3号(1/2MSO+50μLAs+2 mL农杆菌悬浮液)浸染液有利于抗性芽的分化,乙酰丁香酮可以提高叶片的转化率,共培养3 d的分化率较高.共获得经过卡那霉素筛选的114个转化植株,对初筛株系进行PCR分子鉴定,结果有55%的植株扩增出目的条带,初步证明Cry1Ab基因已整合到马铃薯的基因组中.转化植株的抗虫性鉴定正在进行中.
关键词： 农杆菌 Cry1Ab基因 基因转化 马铃薯 转基因植株
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小细胞团为受体的根癌农杆菌介导的非洲菊基因转化体系
《西南农业大学学报(自然科学版) 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：以非洲菊叶柄基部的愈伤组织为起始材料,通过匀浆将其切割成小细胞团,再利用该小细胞团为外植体进行农杆菌介导的GUS基因转化。标记基因GUS的转化及转化愈伤组织的X-G luc染色证明了该方法可以高频率地(>80%)获得转化愈伤组织;通过对转化愈伤组织的再生培养,获得了8株X-G luc染色阳性植株;转化植株的PCR检测和Southern分子杂交检测进一步表明,目的基因已整合入非洲菊基因组中。
关键词： 非洲菊 小细胞团 β-葡糖酸苷酶(GUS) 基因转化
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农杆菌介导的水稻转Bt基因研究
《云南植物研究 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：通过农杆菌介导法 ,将Bt毒蛋白基因的一种—cryIAb基因导入 2个云南水稻栽培品种(滇系 4号 ,合系 39号 )的愈伤组织中 ,经过潮霉素筛选后 ,获得了一批抗性苗 ,部分苗经PCR检测为阳性 ,GUS组织化学染色分析发现Bt基因已整合到水稻基因组 ,并由此建立了一套有效的水稻遗传转化体系。实验中发现培养器皿的透气性对水稻愈伤组织的形成、生长具有较大的影响 ,提高培养基的渗透势能够提高愈伤组织的分化率。选择合适的洗菌液渗透势能够大大降低洗菌对愈伤组织所造成的损伤 ,从而提高转化率。
关键词： Bt基因 水稻愈伤组织 根癌农杆菌 基因转化 PCR分析
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提高农杆菌介导法将PinII抗虫基因导入滇型水稻的转化效率
《分子植物育种 》 2004 CSCD
摘要：本论文对滇型水稻品种玉优一号、HT - 7的愈伤组织诱导、基因转化及植株再生进行了研究。通过实验 ,将质粒 pCAMBI130 0上带有的PinⅡ抗虫基因导入水稻愈伤组织细胞中 ,获得了一批Hyg抗性植株 ,185株抗性苗经过PCR检测和叶片对潮霉素的抗性试验 ,证明其中有 5 9株为转基因阳性植株。结果显示 ,受体、农杆菌状态以及共培养方式等是影响基因转化效率的关键因素 ;以叶片对潮霉素的抗性作为转基因植株的快速筛选是可行的 ,大大提高了检测效率。
关键词： 滇型水稻 根癌农杆菌 基因转化 PinII抗虫基因 共培养
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蕃茄转基因受体系统的研究
《应用与环境生物学报 》 1998
摘要：对蕃茄基因转化的受体系统进行了研究结果表明：在蕃茄离体子叶（或子叶切段）培养中，只加细胞分裂素（Zt或BA）即可使不定芽充分分化，而少量生长素对不定芽的分化反而有抑制作用；在所试验过的多种外植体中，以2／3子叶片处切割子叶所产生的外植体用作转化受体最好；不同蕃茄品种、同一品种的不同外植体及同一外植体的不同培养方式等均对转化频率有一定的影响；通过生长素短期刺激诱导，可解决转基因植物生很困难的问题．
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