普洱茶发酵样品胞外酶提取方法的建立

张冬莲; 苏小琴; 段双梅; 崔超; 马燕; 刘本英; 潘映红; 赵明; 《第十六届中国科协年会——分12茶学青年科学家论坛论文集 》 2014 CSCD

摘要：从发酵样品提取胞外酶是应用宏蛋白组学技术研究普洱茶发酵过程酶组成的第一步。本文通过对不同提取时间(超声2、4、6、8、10min)与4种提取方法(TCA/丙酮沉淀法、Tris/酚抽提-甲醇/醋酸铵沉淀法、Tris-HCl法和尿素/硫脲法)提取样品蛋白含量以及十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE)结果比较,建立了以5×Tris-HCl(pH7.4)为缓冲液,冰浴超声提取2min,酚抽提2次,﹣20℃甲醇/醋酸铵沉淀过夜,预冷丙酮洗涤的从普洱茶发酵样品提取胞外酶的方法...

关键词： 普洱茶 发酵阶段样 宏蛋白组学 提取方法