甘兰型油菜双低品种抗病毒遗传转化的研究

万萌; 寸守铣; 邱仕芳; 李根泽; 曾黎琼; 和江明; 《西南农业学报 》 1995

摘要：用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＢＴＵ的农杆菌转化油菜花培双低品种Ｈ０９０．Ｈ１６６，获得了大量转基因植株。载体质粒ｐＢＴＵ上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭ３５Ｓ启动子控制的芜菁花叶病毒ＴｕＭＶ－ｃｐ外壳蛋白基因，用品种Ｈ０９０和Ｈ１６６的带柄子叶与携带载体质粒的农杆菌共培养后，将其转移到含有６－ＢＡ１－１０ｍｇ／ｌ的ＭＳ培养基中，７～１５天后又将其转移到含有６－ＢＡ１－１０ｍｇ／ｌ的ＭＳ加卡那霉素１０ｍｇ的培养基上培养筛选２～３周后，在子叶柄基部出现小丛芽，将其切下转入Ｂ５加卡那霉素１０ｍｇ的培养基中进一步筛选并使转化体生根，将生根的正常绿色植株移栽于花盆中，接种ＴｕＭＶ进行攻毒试验，这些植株未出现发病现象，将未发病的自交种子，播种于含有卡那霉素的Ｂ５培养基上再一次进行抗性鉴定，均未出现白化苗。结果表明：卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）已转入油菜植株。

关键词： 油菜；遗传转化；芜菁花叶病毒外壳蛋白基因