烤烟栽培品种G－28、K326抗病毒遗传转化的研究

吕华飞; 何云昆; 赵淑珍; 王苏燕; 叶寅; 张仲凯; 田波; 《西南农业学报 》 1994

摘要：用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＥＣ２３和ｐＲＣＰⅠ的农杆菌转化云南烤烟栽培品种Ｇ－２８和Ｋ３２６，获得了大量转基因植株，载体质粒ｐＥＣ２３上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭＶ３５ｓ启动子控制的烟草花叶病毒（ＴＭＶ）５４ＫＤ蛋白基因，ｐＲＣＰⅠ上则有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）外壳蛋白基因、ＣＭＶ卫星ＲＮＡ基因，品种Ｇ－２８、Ｋ３２６的叶片与携带载体质粒的农杆菌共培养后，将其按品种分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ＋２．０ｍｇｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＫＴ培养基上培养筛选，２～３周后分化出芽，切下小芽分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ的培养基上进一步筛选并使转化体生根，再对生根植株叶片进行抗性鉴定，结果表明，至少Ｋｍ抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）已转入烤烟植株。

关键词： 烤烟，抗病毒遗传转化，Km抗性标记基因（NPTⅡ），TMV54KD蛋白