科研产出
两种甘蔗梢腐病病原分子检测技术体系的建立及应用
《农业生物技术学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：甘蔗(Saccharum officinarum)是我国最重要的糖料作物,甘蔗梢腐病(Pokkah boeng)对我国蔗糖产业高质量发展带来严重威胁,因此本研究基于甘蔗梢腐病主要病原菌拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)和层出镰孢(Fusarium proliferatum)的核糖体DNA内转录间隔区(nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)序列分别设计了特异性引物,并对采自云南省不同蔗区不同主栽品种上的117份典型甘蔗梢腐病样品进行了PCR分子检测,明确了该区域这2种甘蔗梢腐病主要病原菌的发生情况.结果表明,引物Fp-F3/Fp-R3可从拟轮枝镰孢菌及其侵染甘蔗中扩增出400 bp的特异性片段,而其他甘蔗病害病原菌均未扩增出此片段,该引物最低能检测到的拟轮枝镰孢菌DNA浓度为30 pg/μL;引物Fp-F4/Fp-R4可从层出镰孢菌及其侵染甘蔗中扩增出362 bp的特异性片段,而其他甘蔗病害病原菌均未扩增出此片段,该引物最低能检测到的层出镰孢菌DNA浓度为300 pg/μL.117份样品中有112份样品检出拟轮枝镰孢菌,阳性检出率为95.7%;有103份样品检出层出镰孢菌,阳性检出率为88%;有103份样品为拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌复合侵染,复合侵染率为88%;另有5份样品均未检测出这2种病原菌,可能为其他种引起的甘蔗梢腐病.分别选取不同蔗区不同主栽甘蔗品种上的23个拟轮枝镰孢菌和19个层出镰孢菌的PCR扩增产物进行测序,结果显示,拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌扩增产物序列分别与拟轮枝镰孢菌(GenBank No.KU508286)和层出镰孢菌(GenBank No.MK252904)序列相似性高达99.45%~100%和99.26%~100%.挑取部分序列构建系统发育树,系统发育分析显示测序序列分属于拟轮枝镰孢菌组和层出镰孢菌组.结果表明,本研究建立的检测体系能够准确、快速的检测拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌,云南不同蔗区不同主栽品种轮枝镰孢菌和层出镰孢菌检出率均较高,为云南甘蔗梢腐病重要病原,且复合侵染现象较普遍,其中普洱、临沧、红河和玉溪蔗区拟轮枝镰孢菌为优势种,但层出镰孢菌检出率也较高,且存在其他种.本研究为甘蔗梢腐病病害早期诊断和及时防控提供技术支撑和实践依据.
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示范甘蔗新品种梢腐病病原的检测鉴定
《中国植保导刊 》 2022 北大核心
摘要：甘蔗梢腐病是由镰刀菌引起的一种世界性甘蔗重要病害.为明确云南开远综合试验站示范甘蔗新品种上2种梢腐病病原菌的发生情况,使用检测Fusarium verticillioides和Fusarium proliferarum的特异性引物,对采自云南开远综合试验站的15份典型甘蔗梢腐病样品进行PCR分子检测,在14份样品中检出F.verticillioides+F.proliferarum复合侵染,复合侵染率为93.33%.测序结果显示,检出的F.verticillioides扩增产物序列与F.verticillioides(GenBank登陆号KU508286),F.proliferarum扩增产物序列与F.proliferarum(GenBank登陆号MZ447573)同源性均高达100%,经系统发育分析,两者分属于E proliferarum组和F.proliferarum组.研究结果表明,开远综合试验站示范甘蔗新品种梢腐病病原菌主要有F.verticillioides和F.proliferarum,且复合侵染现象较普遍.
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甘蔗褐条病与梢腐病病原菌快速大量产孢的培养方法
《中国糖料 》 2022
摘要：甘蔗褐条病和梢腐病是为害甘蔗叶部的灾害性真菌病害.为了改善马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基存在病菌生长速度缓慢、产孢时间长、产孢数量少等问题,对甘蔗褐条病与梢腐病病原菌快速大量产孢的培养方法进行了研究.结果表明甘蔗褐条病菌接种于褐条病菌产孢培养基后,经去除菌丝处理后暗培养7d可产生大量褐条病菌分生孢子;甘蔗梢腐病接种于梢腐病菌产孢培养基后,振荡培养3d可产生大量分生孢子.本方法培养基原料简单易得,成本低廉,步骤简单,操作方便,污染率低,与PDA培养基传统培养方法相比,培养周期显著缩短,每个视野分生孢子增加6倍以上,充分满足了甘蔗褐条病和梢腐病深入研究与防控的需求,为甘蔗褐条病和梢腐病病菌变异动态、致病力差异、筛选抗病品种及绿色高效杀菌剂等应用研究提供了基础条件及技术支撑.
关键词： 甘蔗褐条病 甘蔗梢腐病 分生孢子 诱导产孢 培养基
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甘蔗梢腐病暴发流行原因及产量糖分损失测定
《中国糖料 》 2018
摘要：为明确近年甘蔗梢腐病暴发成灾的原因及其为害造成的损失,调查田间自然条件下主栽甘蔗品种受害区和未受害区的病株率,甘蔗收砍期产量及糖分等品质损失;并分析病害流行原因。结果表明:感病品种的大面积种植、高温多湿气候、病原菌积累和栽培管理不当是导致近年该病暴发流行的主因,梢腐病为害的病株率为63.3%~95.0%,平均81.1%;甘蔗实测产量损失率为30.2%~48.5%,平均38.42%;蔗糖分减少2.63%~5.21%,平均3.61%;蔗汁锤度减少2.40~4.69°Bx,平均3.61°Bx;蔗汁重力纯度减少1.99%~8.14%,平均4.83%;蔗汁还原糖分提高0.05%~0.60%,平均0.16%。可见,目前甘蔗梢腐病发生为害严重,造成的甘蔗产量及糖分损失巨大,严重影响甘蔗的增产增收。因此,制定科学有效的甘蔗梢腐病防控对策对中国甘蔗产业的可持续发展具有重要意义。
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