科研产出
甘蔗白叶病植原体PCR检测方法的建立与应用
《甘蔗糖业 》 2023
摘要：为建立简便、快速、特异性的甘蔗白叶病植原体检测方法，本研究根据甘蔗白叶病植原体sec A基因设计特异引物secA-F/secA-R，建立了甘蔗白叶病植原体PCR检测方法。使用该方法可以从含有甘蔗白叶病植原体的甘蔗样品中稳定扩增出目标基因片段，片段长度为350bp。本方法的最低检测浓度为50 fg/μL。应用该方法对云南耿马蔗区采集的7份甘蔗白叶病样品进行了检测鉴定，结果表明，所有样品均为阳性。以上结果表明，本研究建立的甘蔗白叶病植原体PCR检测方法特异性和敏感性好，操作简便，适用于甘蔗白叶病植原体的快速检测。
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耿马甘蔗白叶病植原体昆虫介体调查与检测
《农学学报 》 2022
摘要：为探明云南蔗区甘蔗白叶病植原体的昆虫介体及优势种群,丰富甘蔗植原体病害相关理论和技术基础,制定适用于甘蔗白叶病的综合防控措施,2019年采用寻集法和扫网法对甘蔗白叶病发病最为严重的云南省临沧市耿马蔗区进行甘蔗白叶病植原体昆虫介体调查和巢式PCR检测分析.调查检测结果显示,采集到的大青叶蝉(Tettigoniella viridis)和条纹平冠沫蝉(Clovia conifer)2种昆虫介体均被检测为阳性,是甘蔗白叶病植原体的自然携带者,说明2种叶蝉可能为甘蔗白叶病植原体潜在昆虫介体;大青叶蝉若虫呈强阳性,初步确定为优势种群.鉴于目前云南蔗区甘蔗白叶病植原体传播方式主要是带毒蔗种和叶蝉类昆虫介体,建议建立甘蔗无病健康种苗繁育基地,及时杀灭蔗园中叶蝉类昆虫介体,从源头上控制甘蔗白叶病的扩散蔓延,降低田间自然传播速度.
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甘蔗白叶病抗病性鉴定方法的建立与应用
《植物保护 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立简便高效、致病性稳定和规范实用的甘蔗抗白叶病鉴定方法,推动甘蔗抗白叶病育种,本文从甘蔗材料处理与种植、接种液配制、接种方式、病情调查、分级标准制定等层面对甘蔗抗白叶病鉴定技术进行了系统研究与探索,首次优化创建了简便高效、致病性稳定和规范实用的甘蔗抗白叶病鉴定方法,即种苗喷雾接种法和生长期切茎接种法。种苗喷雾接种法:直接筛选甘蔗白叶病植原体蔗茎榨汁加10倍量无菌水配制接种液,接种液喷洒蔗种,塑料薄膜保湿,接种材料桶栽置于防虫温室培养,接种种植30 d开始调查病株率,按1～5级标准进行抗病性评价。切茎接种法:直接筛选甘蔗白叶病植原体蔗茎榨汁加10倍量无菌水配制接种液,鉴定材料桶栽置于防虫温室培养,株龄6月时切茎用移液枪将100μL接种液滴入根部切口接种,接种种植20 d开始调查病株率,按1～5级标准进行抗病性评价。两种方法与自然传播相似,接种后发病显著、灵敏度高、重现性好,抗性鉴定结果与田间自然发病相吻合。通过两种接种方法和田间自然发病调查,鉴定明确了10个主栽品种对甘蔗白叶病抗病性,其抗病性真实、可靠,可作为今后甘蔗抗白叶病鉴定标准品种。
关键词： 甘蔗白叶病 接种技术 种苗喷雾接种法 切茎接种法 抗病鉴定
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云南西盟蔗区发现检疫性病害甘蔗白叶病
《农学学报 》 2019
摘要：研究旨在明确2018年在云南西盟蔗区发现的甘蔗病害是否为植原体引起的甘蔗白叶病.使用植原体16S rRNA基因序列通用引物P1/P7和R16F2n/R16R2对10份采自云南西盟蔗区的疑似甘蔗白叶病样品进行巢氏PCR检测,并将巢氏PCR产物进行克隆测序和序列分析.巢氏PCR结果表明:所有10份样品均能扩增得到1240 bp左右的片段.测序结果表明所有获得的10条16S rRNA基因序列大小均为1247 bp,序列间的核苷酸一致性为100%.BLASTN分析表明,从病株扩增到的所有核苷酸序列与先前云南临沧甘蔗白叶病植原体分离物LC7和LC9的16S rRNA基因序列(Genbank登陆号:KR020691和KR020692)的核苷酸序列一致性为100%.虚拟RFLP分析表明,西盟分离物的16S r RNA基因序列的酶切图谱与16SrXI-B亚组植原体相同.本研究结果表明,云南西盟蔗区发现的甘蔗病害为16SrXI-B亚组植原体引起的甘蔗白叶病.
关键词： 云南 西盟 检疫性病害 植原体 甘蔗白叶病 16SrXI-B亚组
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国外引进甘蔗材料白叶病植原体巢式PCR检测及其序列分析
《植物保护 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为有效防止引起重要危险性检疫病害甘蔗白叶病(SCWL)的植原体病原随引进甘蔗材料侵入我国,确保我国甘蔗生产安全,本研究对从缅甸、菲律宾、法国和泰国引进的22个甘蔗材料进行了SCWL植原体巢式PCR检测,并对阳性样品的巢式PCR产物进行了测序及序列分析。结果表明,18个甘蔗材料呈SCWL植原体阳性,阳性检出率为81.8%。所有SCWL阳性样品的16S-23S基因间隔区片段长210bp,与GenBank中已有的其他SCWL植原体分离物(登录号HQ917068、AB646271)的同源性为99.8%~100%,并在系统发育树中聚为一个类群。根据SCWL的巢氏PCR检测及其序列分析结果,对呈阳性的材料及时进行了集中销毁处理。
关键词： 国外甘蔗材料 甘蔗白叶病 巢式PCR检测 序列分析
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温水处理对甘蔗白叶病植原体的脱除效果研究
《云南农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：甘蔗白叶病(SCWL)是一种易随种苗进行远距离传播的危险性检疫病害.近年从缅甸、菲律宾和法国等国引进的甘蔗品种/材料SCWL植原体阳性检出率高达78%,存在严重的引种安全隐患.本研究选择15个经巢式PCR检测确认带有SCWL植原体的引进甘蔗品种/材料进行温水(50±0.2)℃处理,采用巢式PCR检测SCWL植原体,研究温水处理对SCWL植原体的脱除效果.结果表明:温水处理2h不能有效脱除SCWL植原体,脱除率仅为26.7%.因此,今后在加强与东南亚国家合作深入开展甘蔗品种/材料交换工作中,要重点加强对SCWL植原体检疫检测,一旦发现带有SCWL植原体的品种/材料必须及时进行销毁处理,避免SC-WL植原体随引进品种/材料侵入我国境内扩散蔓延,确保我国蔗糖产业的安全可持续发展.
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