应用DTBIA技术快速检测柑橘黄龙病菌研究

丁芳; 王清廉; 徐国亮; 周佳乐; 曾继吾; 严翔; 夏长秀; 郭俊; 刘永忠; 洪霓; 王国平; 彭抒昂; John S Hartung; 《园艺学报 》 2018 北大核心 CSCD

摘要：柑橘黄龙病病原菌为韧皮部限制性寄生菌Candidatus Liberibacter,迄今为止尚未成功获得离体纯培养。因此基于特异性抗体的高通量血清学检测技术迄今尚未开发。本实验室前期研究利用异源表达重组黄龙病菌外膜蛋白Omp_(CLas)免疫动物,制备并获得了特异性多克隆抗体(Anti-Omp_(CLas)-Pab)。本研究利用直接组织印迹免疫法(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)技术对获得的多克隆抗体的检测效果进行了初步评价,证实该抗体可以特异性识别中国不同地理来源的柑橘黄龙病菌分离物;柑橘叶柄、叶片中脉、枝条、根部、果梗和种子中均存在黄龙病菌,其中根部和种子中的病菌含量相对较低,枝条和叶片中脉中的含量较高。该多克隆抗体的获得为后续快速检测试剂盒或试纸条的研发奠定了基础。

关键词： 柑橘 黄龙病菌 快速检测 DTBIA 多克隆抗体 特异性