科研产出
甘蔗梢腐病致病菌甘蔗镰刀菌的分离及鉴定
《中国农学通报 》 2025 CSCD
摘要：甘蔗梢腐病是由多种镰刀菌引起的真菌性病害。为明确云南甘蔗梢腐病病原种类，从云南开远和孟连采集甘蔗梢腐病样品33份，分离纯化得到菌株FS1和FS2，提取其DNA；利用转录延长因子基因(EF-1α)、微管蛋白基因(TUB2)、聚合酶基因(RPB2)引物序列对分离到菌株进行PCR扩增，获得了与目的条带大小一致的清晰明亮条带；将产物测序后在NCBI网站上进行BLAST比对分析，菌株FS1和FS2的EF-1α序列、TUB2序列和RPB2序列与Fusarium sacchari的EF-1α（登录号MK609907.1）、TUB2（登录号MT011039.1）和RPB2（登录号MW238849.1）序列的相似性和覆盖性均为100%；同时通过MEGA6.0软件以最大似然法建立菌株FS1和FS2的系统发育树，发现FS1、FS2与F. sacchari均聚在同一分支上；因此，根据菌株FS1和FS2的形态学特征以及分子生物学鉴定结果，甘蔗梢腐病的病原菌鉴定为F.sacchari。用F. sacchari孢子接种‘云蔗08-1609’，接种7 d叶片出现退绿和叶片黄化症状；将接种发病叶片进行再次分离和测序，分离到菌株EF-1α序列与F. sacchari的EF-1α（登录号MK609907.1）序列的相似性和覆盖性均为100%。研究表明，F. sacchari为开远和孟连引起梢腐病的致病菌。
关键词： 甘蔗 梢腐病 镰刀菌 分离 鉴定 PCR扩增 系统发育分析
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家蚕二分浓核病毒VD1ORF3基因克隆及序列分析
《现代农业科技 》 2025
摘要：家蚕浓核病是一种严重影响蚕业生产的流行病，其病原为家蚕二分浓核病毒（Bombyx mori bidensovirus,BmBDV）。为了解云南省鹤庆县蚕区BmBDV的发生情况及病毒的遗传分化情况，在云南省鹤庆县收集到15份疑似浓核病感染的病蚕样本，提取样本基因组DNA，根据家蚕二分浓核病毒-镇江株（BmBDV-3）基因组中VD1链的非结构蛋白基因VD1 ORF3序列设计特异性引物，并以病蚕基因组为模板进行PCR扩增，以检测该地区的病蚕是否感染BmBDV，同时比较VD1 ORF3基因同源性和遗传距离，以该基因片段构建系统发育树。PCR扩增结果显示，该地区有5份病蚕样本扩增到特异性目的片段而确定感染BmBDV。系统进化分析得知，家蚕二分浓核病毒-鹤庆株（BmBDV-Heqing）与已报道的家蚕二分浓核病毒-镇江株（BmBDV-3）亲缘关系最近，说明分离得到的家蚕二分浓核病毒为BmBDV-3的一个分离株系。
关键词： 家蚕二分浓核病毒 PCR扩增 系统发育树 同源性 遗传距离 镇江株 鹤庆株
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烟蚜茧蜂体内Wolbachia的wsp基因分子检测及序列分析
《中国植保导刊 》 2015 北大核心
摘要：采用沃尔巴克氏体(Wolbachia)的通用引物、A大组和B大组的特异性引物对烟蚜茧蜂体内Wolbachia的wsp基因进行PCR扩增及分子检测,所获得的基因片段分别命名为w Apr、w Apr A和w Apr B,长度分别为620 bp、566 bp和463 bp。基因序列分析表明,w Apr、w Apr A和w Apr B在对应位置序列仅有4个碱基的差异。系统发育分析表明,该寄生蜂仅感染了A大组的Wolbachia。
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