两种甘蔗梢腐病病原分子检测技术体系的建立及应用

李婕; 李银煳; 普家荣; 张荣跃; 单红丽; 李文凤; 王晓燕; 普金安; 黄应昆; 《农业生物技术学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：甘蔗(Saccharum officinarum)是我国最重要的糖料作物,甘蔗梢腐病(Pokkah boeng)对我国蔗糖产业高质量发展带来严重威胁,因此本研究基于甘蔗梢腐病主要病原菌拟轮枝镰孢(Fusarium verticillioides)和层出镰孢(Fusarium proliferatum)的核糖体DNA内转录间隔区(nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)序列分别设计了特异性引物,并对采自云南省不同蔗区不同主栽品种上的117份典型甘蔗梢腐病样品进行了PCR分子检测,明确了该区域这2种甘蔗梢腐病主要病原菌的发生情况.结果表明,引物Fp-F3/Fp-R3可从拟轮枝镰孢菌及其侵染甘蔗中扩增出400 bp的特异性片段,而其他甘蔗病害病原菌均未扩增出此片段,该引物最低能检测到的拟轮枝镰孢菌DNA浓度为30 pg/μL;引物Fp-F4/Fp-R4可从层出镰孢菌及其侵染甘蔗中扩增出362 bp的特异性片段,而其他甘蔗病害病原菌均未扩增出此片段,该引物最低能检测到的层出镰孢菌DNA浓度为300 pg/μL.117份样品中有112份样品检出拟轮枝镰孢菌,阳性检出率为95.7%;有103份样品检出层出镰孢菌,阳性检出率为88%;有103份样品为拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌复合侵染,复合侵染率为88%;另有5份样品均未检测出这2种病原菌,可能为其他种引起的甘蔗梢腐病.分别选取不同蔗区不同主栽甘蔗品种上的23个拟轮枝镰孢菌和19个层出镰孢菌的PCR扩增产物进行测序,结果显示,拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌扩增产物序列分别与拟轮枝镰孢菌(GenBank No.KU508286)和层出镰孢菌(GenBank No.MK252904)序列相似性高达99.45%~100%和99.26%~100%.挑取部分序列构建系统发育树,系统发育分析显示测序序列分属于拟轮枝镰孢菌组和层出镰孢菌组.结果表明,本研究建立的检测体系能够准确、快速的检测拟轮枝镰孢菌和层出镰孢菌,云南不同蔗区不同主栽品种轮枝镰孢菌和层出镰孢菌检出率均较高,为云南甘蔗梢腐病重要病原,且复合侵染现象较普遍,其中普洱、临沧、红河和玉溪蔗区拟轮枝镰孢菌为优势种,但层出镰孢菌检出率也较高,且存在其他种.本研究为甘蔗梢腐病病害早期诊断和及时防控提供技术支撑和实践依据.

关键词： 甘蔗梢腐病 拟轮枝镰孢 层出镰孢 系统进化分析

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示范甘蔗新品种梢腐病病原的检测鉴定

李银煳; 李婕; 覃伟; 龙朝华; 张荣跃; 王晓燕; 单红丽; 李文凤; 黄应昆; 《中国植保导刊 》 2022 北大核心

摘要：甘蔗梢腐病是由镰刀菌引起的一种世界性甘蔗重要病害.为明确云南开远综合试验站示范甘蔗新品种上2种梢腐病病原菌的发生情况,使用检测Fusarium verticillioides和Fusarium proliferarum的特异性引物,对采自云南开远综合试验站的15份典型甘蔗梢腐病样品进行PCR分子检测,在14份样品中检出F.verticillioides+F.proliferarum复合侵染,复合侵染率为93.33%.测序结果显示,检出的F.verticillioides扩增产物序列与F.verticillioides(GenBank登陆号KU508286),F.proliferarum扩增产物序列与F.proliferarum(GenBank登陆号MZ447573)同源性均高达100%,经系统发育分析,两者分属于E proliferarum组和F.proliferarum组.研究结果表明,开远综合试验站示范甘蔗新品种梢腐病病原菌主要有F.verticillioides和F.proliferarum,且复合侵染现象较普遍.

关键词： 甘蔗梢腐病 病原菌 新品种 PCR检测

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甘蔗褐条病与梢腐病病原菌快速大量产孢的培养方法

单红丽; 李银煳; 李婕; 王晓燕; 张荣跃; 李文凤; 黄应昆; 《中国糖料 》 2022

摘要：甘蔗褐条病和梢腐病是为害甘蔗叶部的灾害性真菌病害.为了改善马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基存在病菌生长速度缓慢、产孢时间长、产孢数量少等问题,对甘蔗褐条病与梢腐病病原菌快速大量产孢的培养方法进行了研究.结果表明甘蔗褐条病菌接种于褐条病菌产孢培养基后,经去除菌丝处理后暗培养7d可产生大量褐条病菌分生孢子;甘蔗梢腐病接种于梢腐病菌产孢培养基后,振荡培养3d可产生大量分生孢子.本方法培养基原料简单易得,成本低廉,步骤简单,操作方便,污染率低,与PDA培养基传统培养方法相比,培养周期显著缩短,每个视野分生孢子增加6倍以上,充分满足了甘蔗褐条病和梢腐病深入研究与防控的需求,为甘蔗褐条病和梢腐病病菌变异动态、致病力差异、筛选抗病品种及绿色高效杀菌剂等应用研究提供了基础条件及技术支撑.

关键词： 甘蔗褐条病 甘蔗梢腐病 分生孢子 诱导产孢 培养基

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复合高效配方药剂对甘蔗梢腐病防控效果评价

单红丽; 张寒舒; 李文凤; 王晓燕; 张荣跃; 仓晓燕; 房超; 李泽娟; 黄丕忠; 周游; 黄应昆; 《植物保护 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：为了筛选防控甘蔗梢腐病的复合高效配方药剂及精准施药技术,为甘蔗梢腐病精准高效防控提供新产品、新技术支撑,选用多菌灵、苯菌灵、百菌清、嘧菌酯、吡唑醚菌酯、苯甲·嘧菌酯6种药剂进行田间药效试验和生产示范验证。结果表明,3个配方药剂50%多菌灵可湿性粉剂1 500 g/hm²+75%百菌清可湿性粉剂1 500 g/hm²、50%苯菌灵可湿性粉剂1 500 g/hm²+75%百菌清可湿性粉剂1 500 g/hm²和25%吡唑醚菌酯悬浮剂600 mL/hm²分别与磷酸二氢钾2 400 g/hm²和农用增效助剂300 mL/hm²复配后对甘蔗梢腐病均具有良好的防治效果,其病株率均在8.62%以下,防效均达90.73%以上,较空白对照甘蔗实测产量平均增加15 489 kg/hm²以上,糖分增加1.8%以上,每公顷用药成本仅270元。本研究显示3个配方药剂是防控甘蔗梢腐病理想的复合高效配方药剂,可在7月-8月发病初期人工和无人机飞防叶面喷施、7～10 d喷1次,连喷2次,可有效控制甘蔗梢腐病暴发流行。

关键词： 甘蔗 复合高效配方药剂 精准施药 梢腐病 防效评价

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复合高效配方药剂对甘蔗褐锈病防控效果评价

张寒舒; 李文凤; 单红丽; 王晓燕; 张荣跃; 房超; 段婷颖; 李泽娟; 黄丕忠; 黄应昆; 《中国农学通报 》 2021 CSCD

摘要：为了筛选防控甘蔗褐锈病的复合高效配方药剂及精准施药技术,选用代森锌、烯唑醇、代森锰锌、嘧菌脂、吡唑醚菌脂、苯甲嘧菌酯、百菌清、多菌灵进行田间药效试验.结果表明,(65%代森锌WP 1500 g+75%百菌清 WP 1500 g+磷酸二氢钾2400 g+增效剂300 mL)/hm2、(12.5%烯唑醇 WP 1500 g+75%百菌清WP 1500 g+磷酸二氢钾2400 g+增效剂300mL)/hm2、(80%代森锰锌WP 1500 g+75%百菌清WP 1500 g+磷酸二氢钾2400 g+增效剂300 mL)/hm2和(30%苯甲嘧菌酯SC 900 mL+磷酸二氢钾2400 g+增效剂300 mL)/hm2等4个配方药剂对甘蔗褐锈病均具有良好的防治效果,其病指均在18.79 以下、防效均达80.53%以上.本研究显示4个配方药剂是防控甘蔗褐锈病理想的复合高效配方药剂,可在7-8 月人工和无人机飞防叶面喷施,7~10天喷1 次,连喷2次.

关键词： 甘蔗 复合高效配方药剂 精准施药 褐锈病 防效评价

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甘蔗抗褐锈病新基因抗感病池构建及SSR多态性引物筛选

王晓燕; 单红丽; 张荣跃; 仓晓燕; 王长秘; 李文凤; 尹炯; 罗志明; 黄应昆; 《中国农学通报 》 2021 CSCD

摘要：由黑顶柄锈菌(Puccinia melanocephala H.Sydow&P.Sydow)引起的甘蔗褐锈病是危害中国甘蔗生产的主要病害之一.为了鉴定和发掘抗褐锈病新基因,防止褐锈病爆发流行和保证甘蔗安全生产,本研究以杂交组合'粤糖03-393'x'ROC 24'抗感分离真实性F,代群体为材料,构建抗感基因池,合成449对引物对抗感亲本及抗感基因池进行抗、感连锁SSR分子标记筛选.结果表明,25对引物在抗感亲本间有多态性,其中4对引物(SMC236CG、SCESSR0928、SCESSR0636、SCESSR2551)在抗感亲本及抗感池间有多态性,初步判定这4个SSR标记在染色体上的位点可能与抗褐锈病新基因存在连锁关系.研究结果为后续开展抗褐锈病新基因定位、为中国甘蔗褐锈病防控及抗病育种奠定了良好的基础.

关键词： 甘蔗 褐锈病 抗病基因 抗感病池 SSR标记

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甘蔗新品种及主栽品种对褐条病的抗性评价

王晓燕; 李婕; 杨昆; 单红丽; 张荣跃; 王长秘; 仓晓燕; 尹炯; 罗志明; 李文凤; 黄应昆; 《植物病理学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：褐条病是为害甘蔗叶部的重要真菌病害,严重发病田块,一眼望去似"火烧状",一般减产18%～35%,蔗糖分降低15%～30%^[1]。该病于1924年在古巴首次发现^[2],至今已有20多个国家报道发生此病,常造成不同程度经济损失^[3]。在中国,尤其近年,感病品种加上多雨高湿导致褐条病在云南及广西等主产蔗区大面积暴发流行,减产减糖严重^[1]。

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低纬高原甘蔗白叶病植原体传播方式测定分析

李婕; 单红丽; 张荣跃; 王晓燕; 仓晓燕; 王长秘; 李文凤; 尹炯; 罗志明; 黄应昆; 《植物病理学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：甘蔗白叶病（Sugarcane white leaf,SCWL）是由16SrXI组植原体引起的甘蔗重要病害^[1],主要通过带病蔗种传播,还可在田间通过叶蝉自然传播^[2,3]。该病1954年首次在泰国发现^[4],现已在印度、巴基斯坦、斯里兰卡、菲律宾、缅甸、越南等国普遍发生,

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甘蔗白叶病抗病性鉴定方法的建立与应用

李文凤; 王晓燕; 仓晓燕; 单红丽; 王长秘; 张荣跃; 尹炯; 黄应昆; 《植物保护 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：为建立简便高效、致病性稳定和规范实用的甘蔗抗白叶病鉴定方法,推动甘蔗抗白叶病育种,本文从甘蔗材料处理与种植、接种液配制、接种方式、病情调查、分级标准制定等层面对甘蔗抗白叶病鉴定技术进行了系统研究与探索,首次优化创建了简便高效、致病性稳定和规范实用的甘蔗抗白叶病鉴定方法,即种苗喷雾接种法和生长期切茎接种法。种苗喷雾接种法:直接筛选甘蔗白叶病植原体蔗茎榨汁加10倍量无菌水配制接种液,接种液喷洒蔗种,塑料薄膜保湿,接种材料桶栽置于防虫温室培养,接种种植30 d开始调查病株率,按1～5级标准进行抗病性评价。切茎接种法:直接筛选甘蔗白叶病植原体蔗茎榨汁加10倍量无菌水配制接种液,鉴定材料桶栽置于防虫温室培养,株龄6月时切茎用移液枪将100μL接种液滴入根部切口接种,接种种植20 d开始调查病株率,按1～5级标准进行抗病性评价。两种方法与自然传播相似,接种后发病显著、灵敏度高、重现性好,抗性鉴定结果与田间自然发病相吻合。通过两种接种方法和田间自然发病调查,鉴定明确了10个主栽品种对甘蔗白叶病抗病性,其抗病性真实、可靠,可作为今后甘蔗抗白叶病鉴定标准品种。

关键词： 甘蔗白叶病 接种技术 种苗喷雾接种法 切茎接种法 抗病鉴定

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甘蔗优良品种(系)对黑穗病的抗性评价

仓晓燕; 夏红明; 李文凤; 王晓燕; 单红丽; 王长秘; 李婕; 张荣跃; 黄应昆; 《作物学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：甘蔗黑穗病是严重影响中国甘蔗产业发展的系统性真菌病害,不同的甘蔗品种对甘蔗黑穗病的抗性不一,筛选和种植抗病品种是防治甘蔗黑穗病最经济有效的措施。为明确近年中国育成的优良品种（系）对甘蔗黑穗病的抗性,筛选抗黑穗病优良品种供生产上推广应用,本研究选择云南元江甘蔗黑穗病高发区,采用人工接种浸渍法,对中国的100个优良品种（系）进行抗性鉴定评价。结果表明, 100个优良品种（系）中56个表现高抗到中抗,占56%, 44个表现为中感到高感2,占44%。研究结果显示目前大面积种植和主推的闽糖69-421、新台糖22号、柳城03-182、柳城03-1137、桂糖42号、粤甘26号、桂糖02-351、云蔗09-1601等品种（系）高度感病,而近年选育的福农15号、福农36号、福农1110、福农07-3206、福农11-2907、闽糖11-610、粤甘39号、粤甘43号、粤甘48号、粤甘49号、粤甘50号、粤糖00-236、赣蔗02-70、云蔗99-596、云蔗03-258、云蔗04-241、云蔗06-80、云蔗07-2800、云蔗08-2060、云蔗10-2698、云蔗13-1139、云瑞10-701、德蔗09-84、德蔗12-88、桂糖08-1589、中蔗1号等26个优良品种（系）高度抗病。建议低海拔河谷甘蔗黑穗病高发区,应加大淘汰感病主栽品种和推广应用抗病优良品种力度,以达到品种合理布局,控制甘蔗黑穗病大发生流行,为甘蔗产业高质量发展提供保障。

关键词： 甘蔗 优良品种(系) 黑穗病 人工接种 抗性

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