科研产出
云南荞麦野生种DNA的提取与RAPD反应体系的构建
《西南农业学报 》 2006 CSCD
摘要：以26份云南荞麦野生种为材料,对其DNA的提取和RAPD反应体系进行探讨.结果表明:采用在CTAB基础上改进的SDS微量快速提取法,并结合提取缓冲液中加入适量的PVP,可以从荞麦野生种的幼嫩茎叶中提取出高质量、高纯度适于RAPD反应的荞麦野生种DNA.通过对影响PCR扩增反应的诸多因素进行分析和优化筛选,建立了适宜云南荞麦野生种RAPD反应的最佳反应体系,为研究荞麦野生种的遗传多样性和种间亲缘关系奠定了基础.
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基于RAPD分析用百合DNA的提取
《生物技术 》 2005 CSCD
摘要：对百合DNA的提取过程进行改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法。结果表明,该方法提取的百合DNA在1%的琼脂糖胶电泳上为清晰的一条带,RNA去除干净,无降解现象,分子量大于23kb,OD260nm/OD280nm值为1.80~2.00。DNA的质量符合百合RAPD(随机扩增多态DNA)分析要求,在百合遗传多态性分析和品种分子鉴定中具有良好的应用前景.
关键词： 百合 RAPD(随机扩增多态DNA) DNA提取
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非洲菊基因组DNA提取及ISSR-PCR扩增模板浓度优化
《云南植物研究 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：以改良的CTAB法为基础 ,对非洲菊基因组DNA提取进行了下述优化 :在第二次用氯仿 异戊醇抽提时 ,加入“PCN”溶液 (0 0 6 75gPVP ,4 5 μl 10 %CTAB +4%NaCl) ,可明显去除多糖 ;在材料研磨时加入化学物质M (0 10 0 0gNa2 SO3 ,0 0 5 0 0gVC)及N (0 0 2 0 0gVE ,0 10 0 0gNa2 B4O7,0 0 2 0 0gPVP ,2 0 0 μlβ -巯基乙醇 ) ,都可去除酚类物质 ,明显提高DNA及ISSR PCR扩增的质量 ,但N的效果稍优于M ;同时加入M、N及“PCN” ,具有明显的优化效果 ,所提 5个样品DNA ,平均A2 6 0 A2 80、A2 6 0 A2 30分别为 1 81、 2 0 2 ,浓度为 0 6 49μg μl,片段大小约为 4 9kb ,ISSR扩增带多且清晰、明亮、稳定性及多态性高 ,表明DNA纯度很高。对扩增反应的最佳模板浓度进行研究表明 ,所提DNA模板必须稀释 30倍 (浓度为 15～30ng μl时 ) ,才能扩增出清晰的谱带。
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