科研产出
家蚕眠期血淋巴酚氧化酶活性变化及其基因表达分析
《南方农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:【目的】探究酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)及酚氧化酶在家蚕眠期血淋巴中的变化规律,为深入解析家蚕眠期酚氧化酶的功能及其基因表达特征提供新线索。【方法】以家蚕四龄将眠、四龄眠(头壳刚开裂)0 h、四龄眠6 h、四龄眠12 h、四龄眠24 h和五龄起蚕为试验材料,采用实时荧光定量PCR检测其血淋巴PPO1和PPO2基因的表达情况,并分析血淋巴酚氧化酶活性的变化规律。【结果】家蚕血淋巴PPO1和PPO2基因在四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期均有一定程度的表达,且两者的变化规律一致,表现为四龄将眠最高、五龄起蚕最低,总体上呈先减后增再减的变化趋势。在家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性整体上也呈先降低后急剧升高再降低的变化趋势,四龄将眠为5.99 U/mg,五龄起蚕为6.02 U/mg,与酚氧化酶原基因表达模式基本一致。【结论】家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性变化规律与酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的转录表达模式基本一致,说明酚氧化酶在家蚕眠期即发挥免疫防御功能,又参与蚕体新旧表皮的更替过程。
关键词: 家蚕 酚氧化酶 酚氧化酶原基因 眠期 血淋巴 变化规律
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喂食细菌对家蚕血淋巴酚氧化酶活性及其基因表达的影响
《中国农学通报 》 2019
摘要:为研究细菌刺激后,家蚕血淋巴酚氧化酶活性及其基因表达变化情况,利用实时荧光定量PCR的方法检测了喂食大肠杆菌和金黄色葡萄球菌后不同时间(6、12、24、48 h)酚氧化酶原基因PPO1和PPO2的表达情况,同时测定了酚氧化酶的活性。结果显示:在喂食2种细菌后的6、12和24 h,家蚕血淋巴中PPO1和PPO2基因上调表达,酚氧化酶活性显著高于对照组。其中喂食革兰氏阴性菌大肠杆菌后,PPO1和PPO2基因相对表达量及酚氧化酶活性在12 h达到峰值,而喂食革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌在24 h出现峰值。家蚕感染革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,酚氧化酶活性及其基因表达存在一定差异,暗示感染不同细菌后诱发的家蚕免疫机制并不完全相同。
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普种繁育系数低的人为因素及改进措施
《中国蚕业 》 2019
摘要:针对影响家蚕普种繁育过程中对交品种饲养比例失调,催青环境因子调节不到位,全程消毒不全面不彻底,种养管理粗放,上蔟及蔟中管理不规范,采茧、运茧和售茧方法不当,削茧、鉴蛹操作粗暴,蛹期保护管理粗放,发蛾失调,制种过程管理不到位等人为因素,采取了周密计划,严格标准化催青,加强桑园管理,狠抓全程消毒,加强饲养和蔟中管理,适时合理采茧售茧,严格削茧、鉴蛹过程的监管,加强蛹期保护工作,严把制种及保种质量关等技术措施,取得了春季克蚁收茧量3.5~4.0 kg、克蚁制种量15~18张,夏秋季克蚁收茧量3.0~3.5 kg、克蚁制种量12~15张的较好成效。
关键词: 家蚕 普种 繁育系数 人为因素 孵化整齐度 孵化率 产卵量 良卵率
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云南家蚕核型多角体病毒分离株的毒力测定及系统进化分析
《昆虫学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:【目的】由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori导致的核型多角体病(血液型脓病)在云南蚕区普遍发生,危害严重,给云南蚕业带来严重的经济损失。本研究旨在测定云南不同蚕区BmNPV分离株的毒力及了解BmNPV在云南的病害流行趋势,为监测和控制云南家蚕血液型脓病打下基础。【方法】通过BmNPV对家蚕5龄幼虫致死率和对家蚕BmN细胞毒力的测定评价了云南蚕区19个BmNPV分离株的致病力;对19个云南BmNPV分离株的bro-d基因进行克隆、测序及系统进化分析。【结果】BmNPV对家蚕5龄幼虫的致死率测定表明,云南不同地区BmNPV毒株对家蚕的口服感染力差异较大;细胞毒力测定结果显示不同BmNPV分离株的出芽型病毒粒子(budded virus, BV)滴度差异较大。进化分析表明,所获取来自云南的19个BmNPV分离株主要分为两个亚群,亚群I在云南省的东部、中部和西部地区均有分布,而亚群II主要集中分布于云南省北部地区。从地理分布图可以看出,亚群I所在地区多为亚热带,温度偏高;而亚群II所处的云南北部地区多为典型高原季风气候,温度相对偏低。【结论】云南蚕区存在丰富的BmNPV株系,各分离株对家蚕的毒力差异较大;云南BmNPV分离株的进化关系在一定程度上与地理气候密切相关。
关键词: 家蚕 蚕区 BmNPV 生物测定 bro-d 云南
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家蚕δ-鸟氨酸转氨酶基因Bmoat转录分析及对免疫的响应
《江苏农业科学 》 2018 北大核心
摘要:分析家蚕δ-鸟氨酸转氨酶基因Bmoat序列信息,明确其组织转录规律,结合家蚕感染BmNPV对其表达的影响,初步探索该基因功能。克隆家蚕δ-鸟氨酸转氨酶基因Bmoat ORF序列,对该基因编码区的氨基酸序列、分子量、结构域等进行生物信息学分析;利用Gene Doc与MEGA 5.0软件对Bm OAT与其他物种δ-鸟氨酸转氨酶进行多序列比对和系统进化分析;利用半定量RT-PCR对其组织和时期转录情况进行分析;实时荧光定量PCR检测家蚕添食BmNPV后Bmoat的表达情况。Bmoat编码407个氨基酸,属非分泌型蛋白,预测分子量为44.7 ku,等电点为6.36。氨基酸序列同源性比较发现,Bm OAT与棉铃虫转氨酶同源性最高,为84.3%。组织和时期转录特征分析表明,该基因在家蚕幼虫的各个组织均表达,且在家蚕整个幼虫时期持续性表达。Bmoat在家蚕感染BmNPV 3 h表达量基因明显上调,而在12、24 h呈现下调,表明Bmoat的表达受到BmNPV感染的诱导。家蚕δ-鸟氨酸转氨酶Bmoat在家蚕感染BmNPV后发生响应,推测该基因参与家蚕免疫应答,进而形成一定的机体能量补偿机制。
关键词: 家蚕 鸟氨酸氨基转移酶(Bmoat)基因 表达 BmNPV感染 转录分析
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8种杀虫剂对朱砂叶螨毒力及家蚕的急性毒性比较
《浙江农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:采用叶碟喷雾法测定鱼藤酮、印栋素、苦参碱、苦皮藤素、藜芦碱、乙基多杀菌素、四氯虫酰胺、吡丙醚等8种常用杀虫剂对桑园朱砂叶螨成螨和螨卵的室内毒力,并以食下毒叶法检测对家蚕3龄起蚕的急性毒性。结果表明:印栋素、苦参碱、鱼藤酮、苦皮藤素、藜芦碱对朱砂叶螨成螨毒杀活性较高,半致死浓度(LC_(50))分别为0.213、0.659、1.621、13.014、16.548 mg·L~(-1);苦皮藤素、印栋素、藜芦碱、鱼藤酮和苦参碱对朱砂叶螨螨卵毒杀活性较高,LC_(50)值分别为0.254、3.497、13.564、21.936、35.030 mg·L~(-1)。3龄起蚕取食添加8种杀虫剂的桑叶48 h后,均出现吐液、拒食、体缩等中毒症状,除吡丙醚属于中等毒性外,其余杀虫剂对家蚕为高毒或剧毒。印栋素、苦参碱、鱼藤酮、苦皮藤素、藜芦碱等杀虫剂可以有效防控桑园朱砂叶螨成螨及螨卵,但在使用中应注意其对家蚕的安全性。
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生物农药橄榄鲨和松螨鲨对朱砂叶螨及家蚕的毒力测试
《中国蚕业 》 2018
摘要:橄榄鲨和松螨鲨是用于作物害螨、粉虱、蚜虫、蓟马等防治的新型广谱杀虫杀螨剂。采用叶碟喷雾法测定了49%橄榄鲨软皂水剂和87%松螨鲨松油乳剂2种药剂对朱砂叶螨敏感种群和抗性种群的室内毒性;采用食下毒叶法测定了49%橄榄鲨软皂水剂和87%松螨鲨松油乳剂2种药剂对家蚕的急性毒性。结果表明:橄榄鲨和松螨鲨对朱砂叶螨2个种群成螨的毒力比螨卵高,而对螨卵的毒力较差,橄榄鲨和松螨鲨不同浓度对朱砂叶螨敏感种群和抗性种群螨卵的孵化率均小于98.00%(对照处理为100%)。添食橄榄鲨浓度为6 125.00~16 333.33 mg/L的家蚕72 h后未见中毒死亡,但发现添食浓度为7 000.00~16 333.33 mg/L的家蚕有轻微中毒症状;添食松螨鲨浓度为1 450.00~2 900.00 mg/L的家蚕出现轻微中毒症状和少量中毒死亡蚕,其中毒死亡率为0.87%~2.22%;橄榄鲨和松螨鲨添食处理的3龄眠蚕体质量均比对照低0.01~0.03 g/头,取食毒叶后的4龄起蚕饥饿48 h后均出现不同程度的死蚕,其死亡率为16.36%~59.80%,而对照未出现死蚕,说明添食橄榄鲨和松螨鲨对家蚕有累积中毒现象。
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8种常用农药对家蚕的慢性毒性测定
《农药 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:[目的]明确8种常用农药在推荐剂量下对家蚕的残留毒性。[方法]采用食下毒叶法评价了田间施用8种常用农药后对家蚕的残留毒性。[结果]8种农药在推荐剂量范围内喷施桑树后,10%四氯虫酰胺悬浮剂和60%乙基多杀菌素悬浮剂药后30 d仍引起家蚕急性中毒,其中毒率分别为18.90%和17.78%;吡丙醚乳油药后3 d未引起家蚕急性中毒,但药后15 d仍造成家蚕不能正常上蔟结茧;小檗碱水剂药后7 d未引起家蚕急性中毒,但药后7~10 d的家蚕不能正常上蔟结茧,药后15 d的多数蚕不能正常上蔟结茧;藜芦碱可溶性液剂药后5 d未引起家蚕急性中毒,但造成少数家蚕不能正常上蔟结茧,多数蚕结薄皮茧;戊菌唑水乳剂、苦皮藤素乳油、鱼藤酮乳油等药后15 d对家蚕的经济性状影响不大,但对家蚕的生长发育有影响,即龄期延长。[结论]戊菌唑水乳剂、苦皮藤素乳油、鱼藤酮乳油、藜芦碱可溶性液剂等4种药剂安全间隔期在15 d以上方可采叶喂蚕;四氯虫酰胺悬浮剂和乙基多杀菌素悬浮剂安全间期超过30 d以上,建议冬季桑园封园时使用;小檗碱水剂和吡丙醚乳油禁止在桑园及周边使用。
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