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干旱胁迫的水稻根高效酵母双杂交体系建立

文献类型： 中文期刊

作者： 付坚 1 ; Linkun Gu 2 ; 郭怡卿 1 ; Liyuan ZHANG 2 ; 王玲仙 1 ; 李定琴 1 ; 王波 1 ; Jeff Qingxi SHEN 2 ; 程在全 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

2.内华达大学拉斯维加斯校区生命科学院

关键词： 水稻根部;干旱胁迫;酵母双杂交文库;滤膜;高效杂交体系

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2013 年 27 卷 02 期

页码： 198-202

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用SMART技术在酵母菌株AH109中构建了干旱胁迫下水稻根部全长cDNA文库,采用改进的滤膜杂交方法建立了高效酵母杂交体系,以抗旱相关水稻转录调控因子OsWRKY71基因作为诱饵对该方法进行检验。实验获得的酵母杂交文库容量为4.9×106,平均插入片段为800bp,达到了基因分离和克隆等后续研究的标准。同时采用滤膜杂交法将文库的杂交效率提高到了6.9%,是液体杂交法的6倍以上。该方法不需要特殊的设备,且具有低消耗和高效率的特点,可用于高通量酵母双杂交分析。

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