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水稻金属硫蛋白基因(MT2bL)启动子的克隆与表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李伟 1 ; 吴超 1 ; 吕永刚 1 ; 张小玲 1 ; 郭效琼 1 ; 张慧鑫 1 ; 董陈文华 1 ; 陈丽娟 1 ; 李东宣 1 ;

作者机构: 1.云南农业大学稻作研究所;云南省农业科学院粮食与作物研究所;省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室

关键词: 水稻(Oryza sativa L.);OsMT2bL基因;启动子;GUS基因表达

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2017 年 15 卷 10 期

页码: 3856-3869

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 金属硫蛋白(metallothionein,MT)富含半胱氨酸,而且能够结合多种金属离子,调控细胞内金属代谢的平衡。本研究根据水稻在减数分裂期、开花期和开花后5 d的基因芯片数据结果,从水稻品种黎榆B(O.sativa L.ssp.japonica C.V.Liyu B)基因组中克隆得到了一个植物MT-2类基因Metallothionein2b-Like(Os MT2b L)的启动子序列,序列全长2 063 bp。利用植物启动子区域顺式作用元件数据库(PLACE)分析表明该启动子序列含有5个CURE(copper-response element)元件(GTAC)以及多个其它顺式作用元件。构建了多个启动子融合表达载体(p Ca MV35S::GUS,p MT2b L::GUS,p Ubi1::GUS,p CYC::GUS和p ACT1::GUS),并通过根癌农杆菌介导转化水稻愈伤组织获得了转基因植株。GUS组织染色结果分析表明,Os MT2b L基因启动子在水稻幼苗期的胚根、胚芽和胚芽鞘中具有高水平的GUS表达活性,特别是在胚根根尖和胚芽顶端的GUS表达活性较高;在减数分裂期的植株叶片、颖壳和开花10 d后的未成熟种子中GUS表达活性也较高;GUS蛋白荧光定量分析结果表明,Os MT2b L基因启动子在水稻叶片中驱动GUS基因表达的活性比Ca MV35S基因启动子高出3倍以上。

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