文献类型： 中文期刊

作者： 赵星月 ¹ ; 陈建斌 ² ; 王曙光 ¹ ; 张晓林 ¹ ; 穆野 ¹ ; 魏辉 ³ ; 赵立华 ⁴ ; 陈永对 ⁴ ; 郑雪 ⁴ ; 陈勇 ³ ; 郑立敏 ² ; 张洁 ⁴ ;

作者机构： 1.西南林业大学生命科学学院

2.湖南省植物保护研究所

3.福建省农业科学院植物保护研究所

4.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

关键词： 西花蓟马;酵母双杂交;番茄环纹斑点病毒;NSs蛋白;VDAC

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2020 年 006 期

页码： 735-743

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子.[方法]利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况.再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系.[结果]构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性.序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC).酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作.GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用.[结论]通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作.这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础.