文献类型: 中文期刊
作者: 赵星月 1 ; 陈建斌 2 ; 王曙光 1 ; 张晓林 1 ; 穆野 1 ; 魏辉 3 ; 赵立华 4 ; 陈永对 4 ; 郑雪 4 ; 陈勇 3 ; 郑立敏 2 ; 张洁 4 ;
作者机构: 1.西南林业大学生命科学学院
2.湖南省植物保护研究所
3.福建省农业科学院植物保护研究所
4.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
关键词: 西花蓟马;酵母双杂交;番茄环纹斑点病毒;NSs蛋白;VDAC
期刊名称: 昆虫学报
ISSN: 0454-6296
年卷期: 2020 年 006 期
页码: 735-743
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: [目的]筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子.[方法]利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况.再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系.[结果]构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性.序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC).酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作.GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用.[结论]通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作.这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础.
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