文献类型： 中文期刊

作者： 柴建萍 ¹ ; 江秀均 ² ; 倪婧 ² ; 罗雁婕 ² ; 白兴荣 ³ ;

作者机构： 1.云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

2.;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

3.;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所;

关键词： 桑粉虱;线粒体COⅠ基因;种特异性引物;筛选

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2017 年 07 期

页码： 1570-1575

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】桑粉虱Pealius mori(Takahashi)与其他种类粉虱形态相似,识别困难。设计、筛选桑粉虱种特异性引物,为桑粉虱检测和鉴定提供理论依据。【方法】DNAMAN软件比较与桑粉虱同源性较高的国内外具有代表性的7种粉虱线粒体COⅠ基因序列,应用Primer 5.0软件设计5对桑粉虱COⅠ基因特异性引物。将各对引物与不同种类粉虱成虫基因组DNA模板进行PCR扩增,检测目的条带,筛选桑粉虱种的特异性引物。以桑粉虱的卵和幼虫基因组DNA为模板,验证所筛选出的桑粉虱种特异性引物的灵敏性。【结果】2对桑粉虱种特异性引物sfs1-1/sfs1-2、sfs5-1/sfs5-2对桑粉虱单头成虫基因组DNA的PCR扩增产物分别为450、300 bp,而对烟粉虱B型、温室白粉虱无扩增效果。2对引物对桑粉虱DNA模板浓度最低检测值分别为0.15 pg/μl、0.15 ng/μl。引物sfs1-1/sfs1-2灵敏性较引物sfs5-1/sfs5-2高1000倍。2对引物对桑粉虱成虫、幼虫及卵粒的线粒体COⅠ基因皆具较好扩增能力。【结论】引物sfs1-1/sfs1-2、sfs5-1/sfs5具桑粉虱种的特异性,引物sfs1-1/sfs1-2为桑粉虱检测、鉴定的首选引物。