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番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备

文献类型： 中文期刊

作者： 郑宽瑜 1 ; 董家红 1 ; 尹跃艳 2 ; 方琦 1 ; 苏晓霞 1 ; 张仲凯 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室

2.云南省农业科学院高山经济植物研究所

关键词： 番茄环纹斑点病毒;非结构蛋白;原核表达;抗血清;检测

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2015 年 28 卷 01 期

页码： 168-171

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础。

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