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大蒜RAPD反应体系的建立及优化

文献类型: 中文期刊

作者: 杨正安 1 ; 韩曙 1 ; 丁玉梅 2 ; 朱海山 1 ; 张宏 1 ; 王丰榆 1 ;

作者机构: 1.云南农业大学园林园艺学院

2.云南省农业生物技术重点实验室

关键词: 大蒜;基因组DNA;随机扩增多态性DNA;反应体系;优化

期刊名称: 西南农业学报

ISSN: 1001-4829

年卷期: 2006 年 19 卷 0z1 期

页码: 67-70

收录情况: CSCD

摘要: 该试验以弥渡紫皮大蒜叶片基因组DNA为试材,采用不同浓度MGCL2、引物、DNTP、TAPDNA聚合酶对大蒜的RAPD体系进行单因素反应条件优化.结果表明,25μL总反应体积中,最佳浓度配比为:模板DNA 40NG,MGCL2 2.0 MMOL/L,引物12 PMOL,DNTP 50μMOL/L,TAQ DNA聚合酶1 UNIT,10*反应缓冲液2.5μL.扩增程序为:94℃变性3 MIN,94℃变性30 S,37℃退火30 S,72℃延伸1 MIN,共35个循环,72℃最终延伸10 MIN.

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