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百合鳞片DNA提取及RGA-PCR体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 杨秀梅 1 ; 瞿素萍 1 ; 王丽花 1 ; 崔光芬 1 ; 彭绿春 1 ; 王继华 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院花卉研究所农业部花卉质检中心

关键词： 百合;DNA提取;RGA-PCR

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2011 年 24 卷 01 期

页码： 266-269

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以百合鳞片为材料,采用改良的CTAB法获得了高质量的基因组DNA。通过影响PCR反应各因子的优化,建立了适合百合的RGA-PCR反应体系:25μl体系中含30 ng模板DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L dNTPs、0.6μmol/L引物及1.5 UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,44℃退火1 min,72℃延伸2 min,40个循环;最后72℃延伸7 min。利用该体系对35个百合品种进行RGA-PCR,表明该反应体系具有较好的稳定性和可靠性。

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