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番茄斑萎病毒运动蛋白NSm的原核表达及抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 尚卫娜 1 ; 郑宽瑜 2 ; 董家红 2 ; 张仲凯 2 ; 洪健 3 ; 周雪平 3 ;

作者机构： 1.浙江大学生命科学研究院

2.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

3.浙江大学生物技术研究所

关键词： 番茄斑萎病毒;NSm蛋白;多克隆抗体;免疫胶体金标记

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2015 年 45 卷 06 期

页码： 592-597

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达NSm蛋白,以Ni~(2+)-NTA agarose亲和柱纯化该蛋白与His组氨酸的融合蛋白,免疫家兔制备融合蛋白多克隆抗体。Western blot检测显示,该抗体与NSm重组蛋白以及普通烟病叶中的NSm蛋白具有特异性反应。采用该抗体对TSWV感染的普通烟叶片低温超薄切片进行免疫胶体金标记,透射电镜观察发现特异性金颗粒主要定位在病叶细胞的胞间连丝中,而健康烟草叶片组织中没有金颗粒特异性标记。结果表明,该抗体可用于研究NSm在细胞中的定位。

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