文献类型: 中文期刊
作者: 尹跃艳 1 ; 董家红 1 ; 程晓非 1 ; 李婷婷 1 ; 丁铭 1 ; 方琦 1 ; 张仲凯 1 ;
作者机构: 1.云南省农业生物技术重点实验室
关键词: 番茄环纹斑点病毒;核壳体蛋白;原核表达;血清学相关性
期刊名称: 植物病理学报
ISSN: 0412-0914
年卷期: 2011 年 41 卷 05 期
页码: 482-485
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是番茄斑萎病毒属的一个新种,对云南番茄、辣椒生产造成严重危害。用RT-PCR从感病番茄中扩增得到长度为837 bp TZSV的核壳体蛋白基因(N基因),将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组原核表达载体pET-TZSV-N,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分析表明,该载体高效表达33kDa的融合蛋白;以纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔制备TZSV核壳体蛋白(N蛋白)的多克隆抗体,间接酶联免疫测定(ID-ELISA)表明效价为1/6 000;Western blot分析表明,该抗血清能与西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)血清组的辣椒褪绿病毒(CaCV)反应,而与番茄斑萎病毒(TSWV)、凤仙花坏死斑病毒(INSV)无血清交叉反应,说明获得的抗血清能用于WS-MoV血清组成员的检测,TZSV属于WSMoV血清组成员。
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