文献类型: 中文期刊
作者: 朱峰 1 ; 李孝良 2 ; 唐旭东 2 ; 徐莉 2 ; 白兴荣 1 ; 沈中元 2 ;
作者机构: 1.云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所
2.江苏科技大学生物与环境工程学院
关键词: 家蚕微孢子虫;海藻糖合成酶;基因克隆;序列分析;原核表达;多克隆抗体
期刊名称: 蚕业科学
ISSN: 0257-4799
年卷期: 2017 年 43 卷 05 期
页码: 796-802
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 海藻糖在保护细胞质膜和生物大分子空间结构,维持胞内渗透压增大的过程中发挥重要作用,海藻糖合成酶是海藻糖合成途径中的一个关键酶。通过检索微孢子虫基因组数据库发现,家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)基因组中含有4个海藻糖合成酶基因,其中Nbtps1基因的开放阅读框长1 386 bp,为单外显子结构,编码461个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量53.7 k D,等电点5.19。Nb TPS1蛋白序列含有1个糖基转移酶结构域和4个潜在的N-糖基化位点,亚细胞定位预测该蛋白质位于细胞质中。多重序列比对分析结果表明,Nb TPS1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)、兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)海藻糖合成酶的氨基酸序列相似度分别为59.0%、54.7%,系统发育进化树显示三者的亲缘关系与之相符。构建重组表达载体Nbtps1/p ET-28a(+)并转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导表达及亲和纯化后获得最终质量浓度为1.18 mg/m L的重组融合蛋白His-Nb TPS1。用纯化后的融合蛋白制备兔多克隆抗体Anti-Nb TPS1,利用间接ELISA法测定多克隆抗体的效价达1∶25 600,并通过Western blotting检测验证了该多克隆抗体的特异性,为研究Nb TPS1的生物学功能以及家蚕微孢子虫的间接免疫检测奠定了实验基础。
- 相关文献
[1]桑树几丁质酶基因Machi1的克隆及原核表达. 肖圣燕,朱峰,冉瑞法,李镇刚,张永红,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019
[2]琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析. 李琼艳,陈安利,荀利杰,刘增虎,廖鹏飞,杨伟克,董占鹏. 2021
[3]滇龙胆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因GrDXR的克隆、序列分析与原核表达. 张晓东,赵静,李彩霞,李涛,王元忠. 2014
[4]滇龙胆GrGPPS基因的克隆及其序列分析与原核表达. 王彩云,李富生,李涛,李彩霞,张晓东,王元忠. 2014
[5]滇龙胆GrCYP450-17基因的克隆、序列分析与原核表达. 张晓东,李彩霞,李泽君,李涛,王元忠. 2014
[6]滇龙胆GrSLS1基因的克隆与原核表达. 张晓东,李彩霞,王连春,李涛,王元忠. 2014
[7]家蚕微孢子虫感染对家蚕海龟蛋白(Bmtutl)基因表达水平的影响. 朱峰,高建华,张永红,肖圣燕,邵榆岚,唐芬芬,白兴荣. 2019
[8]烟草花叶病毒原核表达外壳蛋白抗体制备及快速检测方法建立. 卢训,方琦,尹跃艳,秦西云,丁铭. 2014
[9]滇龙胆甲羟戊酸二磷酸脱羧酶基因的克隆与表达分析. 张晓东,李彩霞,王元忠. 2015
[10]蓖麻蚕微孢子虫孢壁蛋白NpSWP12基因的克隆分析与原核表达. 朱峰,肖圣燕,张永红,唐芬芬,邵榆岚,陈世良,白兴荣. 2015
[11]云南红梨PyMT基因的克隆、原核表达和功能分析. 樊磊,张晓东,陈丽梅,苏俊,舒群,李昆志. 2011
[12]滇龙胆GrWRKY5基因的克隆和植物表达载体构建. 王彩云,李富生,李涛,李彩霞,张晓东,王元忠. 2015
[13]从云南省地方黄茧品种B黄2克隆的类胡萝卜素结合蛋白基因的cDNA序列分析. 白兴荣,付坚,廖鹏飞,董占鹏,黄平. 2010
[14]琥珀蚕胆绿素结合蛋白基因AaBP-1的克隆及表达分析. 李琼艳,陈安利,钟健,刘增虎,廖鹏飞,杨伟克,董占鹏. 2019
[15]茶树CsAP2基因的全长cDNA克隆与序列分析. 方成刚,夏丽飞,陈林波,田易萍,包云秀,尚未琼. 2014
[16]茶树‘紫娟’肉桂酰辅酶A还原酶基因(CCR)克隆及序列分析. 陈林波,宋维希,李晓霞,夏丽飞,周萌,梁名志,焉文光. 2016
[17]茶树HMGS基因的克隆与序列分析. 陈林波,刘本英,汪云刚,夏丽飞,李友勇,田易萍. 2013
[18]家蚕微孢子虫感染对家蚕BmN细胞凋亡以及凋亡蛋白抑制因子IAPs表达的影响. 朱峰,肖圣燕,张永红,邵榆岚,唐芬芬,陈世良,白兴荣. 2017
[19]母蛾经高温干燥处理不同时间对体内家蚕微孢子虫的灭活效果. 陈世良,杨荣贵,高建华,高翔,张金祥,朱峰. 2015
[20]家蚕微孢子虫SWP25基因BmN细胞表达质粒的构建及表达. 肖圣燕,李镇刚,冉瑞法,黄平,朱峰,沈中元. 2016
作者其他论文 更多>>
-
云南野桑蚕线粒体基因组特征及系统发育分析
作者:张永红;李平平;邵榆岚;倪婧;刘敏;白兴荣
关键词:野桑蚕;线粒体基因组;进化分析
-
桑褐斑壳丰孢菌pmcamk基因的克隆与表达时相分析
作者:肖圣燕;程隆基;许凯;蔡威;江秀均;白兴荣;朱峰
关键词:桑褐斑病;桑褐斑壳丰孢菌;钙/钙调素依赖性蛋白激酶;基因克隆;表达时相
-
家蚕不结茧原因分析与预防建议
作者:王建明;杨振国;白兴荣;王芳红
关键词:家蚕;农药;蔬菜;昆虫生长调节剂;不结茧
-
不同消毒方法对家蚕微粒子的存活和侵染力影响
作者:李玲利;苏振国;张永红;邵榆岚;白兴荣
关键词:温度;紫外线;三氯异氰脲酸;戊二醛癸甲溴铵;消毒;家蚕微粒子
-
乙唑螨腈在桑园红蜘蛛防治中的应用前景
作者:杨振国;谢道燕;柴建萍;白兴荣
关键词:乙唑螨腈;桑树;朱砂叶螨;二斑叶螨;交互抗性;降解性;安全性
-
云南省蚕农面临的蚕业风险及其政策期望-基于7个市(州)14个蚕区139户农户的问卷调查
作者:刘位芬;李镇刚;白兴荣;李金见;李红;钱荷英;徐安英
关键词:家蚕;桑树;病虫害;饲育户;生产风险;问卷调查
-
我国桑园用农药登记现状分析
作者:杨振国;谢道燕;白兴荣
关键词:桑树;蚕桑;农药登记;桑树病虫害;桑园专用农药