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利用正交设计优化甘蔗SRAP-PCR反应体系

文献类型： 中文期刊

作者： 昝逢刚 1 ; 刘家勇 1 ; 赵俊 1 ; 赵培方 1 ; 吴转娣 1 ; 吴才文 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室

关键词： 甘蔗;SRAP-PCR;正交设计;优化

期刊名称： 中国糖料

ISSN： 1007-2624

年卷期： 2011 年 03 期

页码： 6-8

摘要： 利用正交设计L16(45)对甘蔗SRAP-PCR反应体系的五大因素(Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA、Taq酶)在4个水平上进行优化,得到如下结论:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次是:Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA;通过对各因素进行筛选,建立甘蔗SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为:dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.1μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、Taq酶0.25U和模板DNA 60 ng。

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