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云南药用野生稻高质量染色体DNA的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 李娥贤 1 ; 殷富有 1 ; 张敦宇 1 ; 陈越 1 ; 余腾琼 1 ; 雷涌涛 1 ; 肖素勤 1 ; 程在全 1 ; 柯学 1 ;

作者机构: 1.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室/云南省稻种材料工程技术研究中心

关键词: 药用野生稻;染色体DNA;DNA制备

期刊名称: 作物杂志

ISSN: 1001-7283

年卷期: 2020 年 005 期

页码: 103-109

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 药用野生稻是我国3种野生稻之一,蕴含丰富的优异基因资源,但由于其CC基因组与栽培稻的AA基因组差异大,远缘杂交不亲合,不易获得后代材料,导致育种中优异基因无法利用.构建大片段基因组文库是研究及利用基因的重要方法,而提取高质量的染色体DNA是建立BIBAC等大片段基因组文库的前提,但按常规方法很难从药用野生稻中提取到Mb级的染色体DNA,需要对提取体系进行优化.本研究对取材与研磨、细胞核的分离与包埋、组蛋白的去除与DNA释放、DNA的酶解与回收等实验步骤进行优化,从药用野生稻中成功提取出1.9Mb的高质量染色体DNA,并对酶解消化体系进行了摸索,制备的染色体DNA可用于构建大片段基因组文库.

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