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马铃薯RAPD分析方法优化初探

文献类型: 中文期刊

作者: 李先平 1 ; 何云昆 1 ; 孙茂林 1 ; 李云海 1 ; 邓纪新 1 ; 赵志坚 1 ;

作者机构: 1.云南省农科院生物技术研究所

关键词: 马铃薯;RAPD

期刊名称: 西南农业学报

ISSN: 51-1213/S

年卷期: 2000 年 13 卷 01 期

页码: 59-64

收录情况: CSCD

摘要: 以云南马铃薯主要栽培品种为材料 ,使用进口PCR仪 ,对马铃薯RAPD分析中的DNA模板浓度、引物浓度、dNTP浓度以及PCR扩增反应循环次数进行了研究。结果表明适用于马铃薯RAPD反应的最佳条件为 :模板DNA1 5~ 5 0ng ,1 0 mer随机引物 2 5~ 5 0ng ,dNTP2 0 0 μM ,扩增反应周期 40~ 45个循环。每个循环包括 94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min。使用这一RAPD程序对云南的主要栽培品种进行品种鉴别 ,能有效区分出所有参试品种 ,检测出品种CFK6 9 1遗传背景特殊 ,较之于普通栽培品种亲缘关系较远。本实验建立了适宜马铃薯RAPD分析的PCR程序及条件 ,为RAPD应用于马铃薯的遗传研究打下了基础。

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