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阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究

文献类型： 中文期刊

作者： 潘敏慧 1 ; 刘敏 1 ; 刘佳 1 ; 杜娟 1 ; 张春东 1 ; 鲁成 1 ;

作者机构： 1.西南大学

关键词： 家蚕;阳离子脂质体;细胞转染;转基因细胞系

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2008 年 34 卷 04 期

页码： 109-113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。

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