文献类型： 中文期刊

作者： 唐芬芬 ¹ ; 杨伟克 ¹ ; 邵榆岚 ¹ ; 谢道燕 ¹ ; 廖鹏飞 ¹ ; 杨海 ¹ ; 白兴荣 ¹ ;

作者机构： 1.云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

关键词： 家蚕核型多角体病毒;环介导等温扩增技术;早期诊断;蚕业

期刊名称： 应用昆虫学报

ISSN： 2095-1353

年卷期： 2013 年 50 卷 04 期

页码： 1013-1019

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus,BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori引起的家蚕核型多角体病(血液型脓病)在养蚕生产中发生较为普遍,对蚕业生产造成重大的经济损失。本研究建立了快捷有效的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)用于快速检测BmNPV,为蚕业生产提供了一个有效检测BmNPV和进行早期诊断的技术。该方法是针对BmNPV的pe38基因的6个区段设计的6条引物用于扩增检测,整个反应在恒温条件63℃下进行25 min,扩增产物用电泳法和可视法检测(用SYBR Green I染色)。结果显示,LAMP检测方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍,能检测的范围为21个拷贝。另外,用4.86×108OBs/mL感染4龄起蚕,提取血淋巴DNA为模板,PCR在感染36 h后检出病毒DNA,LAMP法能检测感染12h后的样品。