文献类型： 中文期刊
作者： 杨正安 1 ; 丁玉梅 2 ; 张应华 3 ; 张兴国 4 ;
作者机构： 1.西南大学园艺园林学院
2.南方山地园艺学教育部重点实验室
3.云南农业大学园林园艺学院
4.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
关键词： 黑籽南瓜;可转化人工染色体(TAC);基因组文库
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2012 年 20 卷 02 期
页码： 211-217
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 黑籽南瓜(Cucurbita ficifolia)具有很强的抗逆能力,对低温、干旱、贫瘠土壤以及瓜类枯萎病等逆境均具有较强的抗性,这些优良的抗性基因很难通过有性杂交转移到其它瓜类作物上,但可通过可转化人工染色体(TAC)以大片段的形式转化到其它瓜类作物中。本研究利用TAC载体构建了黑籽南瓜基因组DNA文库,该文库包含57560个克隆,保存在150块384孔板中,其库容量相当于黑籽南瓜基因组的7倍。TAC文库克隆插入片段大小分布范围为20～100kb,超过40kb插入片段克隆占40%以上,插入片段平均大小为45kb。在挑取的15个TAC克隆中无空克隆;细菌继代培养30、60和100代后质粒的酶切鉴定表明,TAC克隆可以在大肠杆菌(Escherichia coli)DH10B中稳定复制和保存,说明本研究构建的文库质量较高。该研究结果表明,TAC文库为黑籽南瓜抗性基因的克隆、功能验证、物理图谱的构建和基因组测序等有关研究提供了基础资料。
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