文献类型： 中文期刊

作者： 陈安利 ¹ ; 钟健 ² ; 刘增虎 ² ; 李琼艳 ² ; 廖鹏飞 ² ; 杨伟克 ² ; 董占鹏 ³ ;

作者机构： 1.云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

2.;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

3.;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所;

关键词： 琥珀蚕;内参基因;全长cDNA序列;表达稳定性

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 390-397

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 琥珀蚕(Antheraea assama)是一种重要的野蚕种质资源。为了开展琥珀蚕功能基因的研究,选择合适的内参基因非常必要。通过c DNA末端快速扩增技术获得琥珀蚕功能基因研究的3个常用内参基因β-actin、GAPDH和18S rRNA的c DNA全长序列,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析3个基因在蚕体不同组织中的转录水平,并利用标准化分析软件ge Norm和Norm Finder分析其表达的稳定性。结果显示,3个内参基因的表达稳定性依次为β-actin、GAPDH、18S rRNA。就组织表达而言,β-actin在幼虫的中肠、脂肪体、马氏管、气孔、丝腺和卵巢以及蛹的输卵管中表达相对稳定;就发育时期的表达而言,β-actin在蛾期的表达也相对稳定。此外,GAPDH在幼虫头部、表皮和血液中的表达相对稳定;18S rRNA在幼虫精巢中的表达相对稳定。对琥珀蚕功能基因表达进行qRT-PCR所需内参基因数量的分析表明,选用2个内参基因即可满足试验需求。