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腾冲红花油茶花蜜蛋白1,6-二磷酸果糖醛缩酶的鉴定、克隆与分析

文献类型: 中文期刊

作者: 卿卓 1 ; 苏睿 1 ; 赵文正 1 ; 李林庶 1 ; 任晓晓 1 ; 董坤 1 ; 和绍禹 1 ;

作者机构: 1.云南农业大学动物科学技术学院;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所;云南省腾冲市畜牧工作站

关键词: 腾冲红花油茶;花蜜蛋白;1,6-二磷酸果糖醛缩酶(FBP2);基因表达

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2019 年 07 期

页码: 1303-1310

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为鉴定出花蜜中某些影响花蜜化学组成的功能蛋白,并探讨其在花蜜分泌及组分调控过程中的功能,以腾冲红花油茶为试验材料,利用MALDI-TOF/MS质谱分析方法初步鉴定出腾冲红花油茶花蜜中含有1,6-二磷酸果糖醛缩酶(FBP2),然后根据质谱得到的部分肽段序列设计特异性引物,采用SMART RACE方法克隆腾冲红花油茶花蜜FBP2全长cDNA,命名为CRFBPase (GenBank登录号:MG764086)。序列分析表明,该cDNA全长1 077 bp,编码358个氨基酸,分子质量为38 428.13 Da,等电点为7.56。经同源比对分析发现CRFBPase基因序列与普通油茶的FBP2基因序列同源性高达98.8%,同时酶活检测结果也进一步证实该花蜜中含有FBP2,且该酶的活性会随着花蜜分泌累积时间的延长而增加。实时荧光定量PCR结果显示,CRFBPase基因在开花后第5天的蜜腺和花部组织中均有一定量的表达且蜜腺中表达量最高,开花后第5天(泌蜜高峰期)蜜腺显著高于花蕾期。本研究结果为进一步揭示FBP2在植物花蜜形成、分泌及糖组分调控过程中的作用机制提供了一定的理论依据。

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