甘蔗白叶病植原体巢式PCR检测方法的建立及初步应用

卢文洁; 黄应昆; 李文凤; 王晓燕; 罗志明; 《植物病理学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：甘蔗白叶病(sugarcane white leaf,SCWL)是由植原体引起的重要甘蔗病害[1],广泛分布在印度、泰国等许多国家[1,2]。我国甘蔗产区的栽培品种也有SCWL的发生[3]。甘蔗是无性繁殖作物,植原体可通过繁殖种苗进行传播,台湾斑纹叶蝉(Matsumuratetlix hiroglyhious)通过咬食感染甘蔗植株的韧皮部可引起该病害[4]。SCWL是

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甘蔗黑穗病菌DNA提取及PCR检测

卢文洁; 李文凤; 黄应昆; 罗志明; 王明强; 王晓燕; 《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：本研究利用尿素混合液直接从甘蔗黑穗病菌孢子提取基因组DNA进行PCR检测鉴定,经过反复试验,建立了一种简便、快速的检测鉴定方法。利用建立的方法对12个甘蔗黑穗病样品进行病菌基因组DNA提取,将甘蔗黑穗病菌特异性引物进行PCR检测,均扩增出大小为420 bp的预期DNA片段条带。PCR扩增产物经克隆测序,与GenBank数据库中的甘蔗黑穗病病原菌序列比对,同源性达99%。

关键词： 甘蔗黑穗病菌 基因组DNA 提取方法 PCR检测

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引进甘蔗品种(材料)检疫及重要病害检测

卢文洁; 李文凤; 黄应昆; 王晓燕; 罗志明; 《甘蔗糖业 》 2011

摘要：按照国际标准检疫程序对从菲律宾、泰国、缅甸、柬埔寨等亚洲国家引进的36个甘蔗品种(材料)于昆明甘蔗检疫温室进行了病害疫情监测,未发现疫情;并利用已建立的分子检测技术对甘蔗斐济病、花叶病、白条病和宿根矮化病等4种重要病害进行了检测,结果有8甘蔗品种(材料)宿根矮化病呈阳性,其余均呈阴性。同时对呈阳性的甘蔗品种(材料)进行了隔离处理,从而确保了国际合作甘蔗品种交换的顺利开展。

关键词： 引进甘蔗品种(材料) 重要病害 检疫 分子检测

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甘蔗宿根矮化病菌PCR检测体系的优化与应用

李文凤; 卢文洁; 黄应昆; 王明强; 王晓燕; 罗志明; 《云南农业大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：为建立能快速灵敏检测甘蔗宿根矮化病(ratoon stuning disease,RSD)的PCR检测方法。本文通过改进模板DNA的制备方法,在PCR基本程序的基础上,以甘蔗宿根矮化病菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)16S-23SrDNA基因间隔区特异性引物,调整PCR扩增反应体系各组分的浓度、反应的退火温度、循环参数等主要因子,优化PCR反应体系。此检测体系能从感染RSD的样品中扩增出大小为438 bp的特异性片段,而阴性对照和未感染样品则未扩增出任何片断;未优化仅从稀释30倍的蔗汁总DNA中扩增出RSD的特异性片段,优化后可以从稀释3 000倍的蔗汁总DNA中扩增出RSD的特异性片段。对31份田间采集样品检测,未优化的阳性检出率为32.26%;优化后阳性检出率74.19%,与I-ELISA检测结果一致。应用此检测方法可稳定、快速地检测出蔗株是否感染RSD,且检测效率高,适合于田间大批量样品快速检测。

关键词： 甘蔗宿根矮化病菌 PCR检测 16S-23SrDNA 间接酶联免疫吸附法

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蔗苗枯心率与甘蔗产量构成因素间关系初步研究

罗志明; 王晓燕; 黄应昆; 李文凤; 尹炯; 卢文洁; 薛晶; 何文志; 张会华; 《甘蔗糖业 》 2011

摘要：通过对蔗苗枯心率及甘蔗产量构成因素跟踪调查分析,结果表明,蔗苗枯心率高低与甘蔗有效茎及茎径变化间存在相关性,与株高变化间相关性不明显。在一定枯心率范围内,枯心率与有效茎数呈正相关,与茎径呈负相关。

关键词： 枯心率 有效茎数 茎径 株高

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甘蔗病虫害防治技术及高效低毒农药应用

卢文洁; 徐宏; 李文凤; 罗志明; 王晓燕; 黄应昆; 《中国糖料 》 2011

摘要：对严重影响甘蔗生产的8种甘蔗主要害虫和5种甘蔗常见流行性病害的发生危害特点进行了探讨和综述。依据甘蔗病虫害的危害特点,提出以农业防治方法为基础,物理防治灯光诱杀、生物防治为辅,减少虫源病源,统一化防为重点和抓好关键时期科学用药的综合防治措施,从而达到高效、快速、持续、有效控制甘蔗病虫害的发生危害,确保甘蔗生产持续稳定健康发展。

关键词： 甘蔗 病虫害 综合防治 高效低毒农药 应用

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云南耿马蔗区甘蔗宿根矮化病的调查及病原检测

李文凤; 王晓燕; 黄应昆; 卢文洁; 罗志明; 尹炯; 《甘蔗糖业 》 2011

摘要：甘蔗宿根矮化病(Ratoon Stunting Disease,RSD)是一种世界性的重要甘蔗病害,对甘蔗生产危害极大。摸清蔗区RSD的分布、发生为害情况,是科学推广温水脱毒健康种苗,有效防控甘蔗宿根矮化病的关键。本文对云南耿马蔗区甘蔗宿根矮化病的发生和分布进行了调查和田间采样,采用PCR和I-ELISA法,对田间采集的97个样本进行RSD检测。结果表明:73个样本为阳性,阳性检出率75.26%,24个样本为阴性,确认耿马蔗区存在RSD;通过系统分析,明确了不同品种、不同植期、不同蔗地RSD发生状况,为耿马蔗区推广应用温水脱毒健康种苗、有效防控甘蔗宿根矮化病提供了科学依据。

关键词： 云南耿马 甘蔗宿根矮化病 发生 检测

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国外甘蔗品种/材料重要病害的检疫及检测

卢文洁; 李文凤; 黄应昆; 王明强; 王晓燕; 罗志明; 《西南农业学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：严格按照国际标准检疫程序要求对从法国、澳大利亚、菲律宾、泰国、缅甸、柬埔寨等国外引进的77个甘蔗品种/材料在昆明专用甘蔗检疫温室,进行了2个生长周期的病虫疫情监测,未发现疫情;并利用已建立的分子检测技术进行了甘蔗斐济病、花叶病、白条病和宿根矮化病等4种重要检疫性病害检测,结果有7个甘蔗品种/材料宿根矮化病呈阳性,其余均呈阴性,同时对呈阳性的甘蔗品种/材料进行了隔离处理,符合标准和要求,从而确保了国际合作甘蔗品种交换的顺利开展。

关键词： 国外甘蔗品种/材料 重要病害 检疫 分子检测

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甘蔗绵蚜综合防治研究进展

尹炯; 黄应昆; 李文凤; 罗志明; 卢文洁; 王晓燕; 《甘蔗糖业 》 2011

摘要：甘蔗是重要的经济作物和糖料作物,甘蔗绵蚜是甘蔗生产上最严重的害虫之一。在明确绵蚜为害规律、生物生态学特性以及影响因素的基础上,总结了各种防治措施的应用概况及其发展前景,为绵蚜的综合管理提供新思维。

关键词： 甘蔗 甘蔗绵蚜 综合防治

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3.6%杀虫双颗粒剂防治甘蔗螟虫药效试验

罗志明; 李文凤; 黄应昆; 卢文洁; 王晓燕; 《农药 》 2010 北大核心

摘要：3.6%杀虫双颗粒剂对甘蔗螟虫具有较好的防治效果。施药60d后,60、75、90kg/hm2(制剂用量)的防效分别为73.36%、85.97%、86.29%。75、90kg/hm2防效与对照药剂3%呋喃丹颗粒剂相当,且明显优于其他对照药剂。3.6%杀虫双颗粒剂可作为防治甘蔗螟虫替代农药,使用剂量以75kg/hm2为宜。

关键词： 甘蔗 杀虫双 螟虫

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