大蒜RAPD反应体系的建立及优化

杨正安; 韩曙; 丁玉梅; 朱海山; 张宏; 王丰榆; 《西南农业学报 》 2006 CSCD

摘要：该试验以弥渡紫皮大蒜叶片基因组DNA为试材,采用不同浓度MGCL2、引物、DNTP、TAPDNA聚合酶对大蒜的RAPD体系进行单因素反应条件优化.结果表明,25μL总反应体积中,最佳浓度配比为:模板DNA 40NG,MGCL2 2.0 MMOL/L,引物12 PMOL,DNTP 50μMOL/L,TAQ DNA聚合酶1 UNIT,10*反应缓冲液2.5μL.扩增程序为:94℃变性3 MIN,94℃变性30 S,37℃退火30 S,72℃延伸1 MIN,共35个循环,72℃最终延伸10 MIN.

关键词： 大蒜 基因组DNA 随机扩增多态性DNA 反应体系 优化