番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备

郑宽瑜; 董家红; 尹跃艳; 方琦; 苏晓霞; 张仲凯; 《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础。

关键词： 番茄环纹斑点病毒 非结构蛋白 原核表达 抗血清 检测