科研产出
植物诱抗剂AHO联合茎尖培养脱除马铃薯S病毒和马铃薯Y病毒
《植物保护 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：研究了植物诱抗剂3-丙酮基-3-羟基羟吲哚（3-acetonyl-3-hydroxyoxindole, AHO）联合茎尖培养从试管苗中脱除马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯Y病毒（PVY）的方法和效率。取PVS侵染的‘定薯3号’和‘定薯4号’以及PVY侵染的‘靖薯3号’和‘靖薯4号’的壮芽，茎尖剥离后培养至4～5个叶片，用100 mg/L植物诱抗剂AHO水剂喷施试管苗，每隔2 d喷施一次，共3次，末次喷施2 d后取茎尖剥离培养，获得再生试管苗。用电子显微镜负染色、ELISA、荧光定量RT-PCR检测再生试管苗的带病毒情况。结果显示，AHO对4个品种的马铃薯试管苗生长无影响，用AHO处理后再茎尖剥离培养，脱毒率均高于未处理的对照；检测结果还显示AHO处理的马铃薯再生苗的带毒量也低于未处理的对照，且随处理次数增加带毒量下降。研究结果表明，利用植物诱抗剂AHO联合茎尖剥离培养方法可以提高脱除PVS、PVY的效率，获得无病毒核心苗。
关键词： 3-丙酮基-3-羟基羟吲哚 茎尖培养 马铃薯S病毒 马铃薯Y病毒 病毒脱除
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会泽晾晒烟化学成分及其细胞毒活性研究
《中药材 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究会泽晾晒烟中的化学成分及其细胞毒活性.方法:运用AB-8大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备型高效液相色谱等方法和MS、NMR等波谱法以及理化性质对化合物进行分离、纯化和鉴定.采用CCK8法测定化合物对人肝癌SMMC-7721细胞的细胞毒活性.结果:从会泽晾晒烟95%乙醇提取物中分离得到24个化合物,分别鉴定为:可替宁(1)、莨菪亭(2)、吲哚-3-羧酸(3)、(1H-indol-3-yl)oxoacetamide(4)、2'-O-甲基腺苷(5)、降烟碱(6)、尼古丁(7)、3-羟基-5α,6α-环氧-β-紫罗兰酮(8)、山柰酚(9)、金雀异黄酮(10)、烟酰胺(11)、麦斯明(12)、绿原酸(13)、2-甲基喹啉(14)、3,4-二羟基苯甲酸(15)、香草酸(16)、新烟碱(17)、儿茶素(18)、芸香叶苷(19)、凯林(20)、3,4-二羟基肉桂酸(21)、二甲基异咯嗪(22)、4-羟基苯乙醇(23)、咖啡酸苯乙酯(24).结论:其中,化合物4、5、8、22为首次从该属植物中分离得到,化合物3、4、9~11、18~22表现出一定的细胞毒活性.
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陆良莴苣类蔬菜斑萎病的侵染循环及其发生流行特点
《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明陆良莴苣类蔬菜斑萎病的侵染循环及其发生流行特征,为绿色防控提供指导。【方法】调查和采集不同发病时期的莴苣类蔬菜斑萎病样品、田间可能的中间寄主杂草与作物、苗棚种苗,应用ELISA检测、电子显微镜负染色与超薄切片观察,确定陆良莴苣类蔬菜斑萎病伴随的病毒种类、侵染循环及其发生流行特征。【结果】陆良莴苣类蔬菜斑萎病的发病率在15%～36%,伴随的病毒仅有番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt Orthotospovirus,TSWV）,细胞病理观察表明生菜斑萎病样品的细胞中仅分布TSWV粒体。TSWV的中间寄主有鬼针草,以及辣椒、马铃薯、烟草等作物。苗棚生菜种苗中TSWV的检出率100%。【结论】陆良莴苣类蔬菜主要病害是由TSWV侵染引起的斑萎病,TSWV在周年分布的鬼针草中形成初侵染源,通过传毒介体蓟马传播到莴苣类蔬菜种苗以及中间寄主作物辣椒、马铃薯、烟草等作物,并在夏秋蔬菜生产季节在这些作物及杂草之间相互传播,形成侵染循环。种苗带毒是陆良莴苣类蔬菜发病率高的主要原因,中间寄主植物的分布、蓟马传播与农事操作进一步加剧斑萎病的发生流行。
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利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白
《昆虫学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子.[方法]利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况.再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系.[结果]构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性.序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC).酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作.GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用.[结论]通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作.这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础.
关键词： 西花蓟马 酵母双杂交 番茄环纹斑点病毒 NSs蛋白 VDAC
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五种芳香植物精油对烟草疫霉的抑菌活性分析
《中国农业科技导报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为实现作物病害的绿色防控,从芳香植物源中筛选高效的杀菌活性成分,采用菌丝生长法测定了迷迭香精油、薰衣草精油、香叶天竺葵精油、香茅草精油和罗勒精油5种精油对烟草黑胫病病原烟草疫霉的抑菌活性.结果表明:当精油浓度达到225μg/m L时,5种精油对烟草疫霉均有显著的抑制作用,其中香茅草精油对烟草疫霉的抑制率均为100%.在熏蒸方式下,5种精油对烟草疫霉抑制的EC50值分别为317.8μg/m L、255.2μg/m L、151.0μg/m L、53.0μg/m L和142.8μg/m L.5种芳香植物精油对烟草疫霉菌丝生长形态均有一定的影响.研究结果表明香茅草精油具有作为防治烟草疫霉环境友好型杀菌剂的先导化合物的潜力.
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番茄环纹斑点病毒(TZSV)侵染对辣椒防御相关物质的影响
《山东农业科学 》 2018
摘要：采用高效液相色谱法(HPLC)对番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)侵染后辣椒和健康辣椒植株(CK)叶片中茉莉酸(jasmonic acid,JA)、水杨酸(jalicylic acid,SA)和茉莉酸-异亮氨酸(jasmonoyl isoleucine,JA-Ile)含量进行测定。结果表明,SA含量在TZSV侵染24、48、96、120、144、168、192、216、240 h后显著高于对照组;JA含量在TZSV侵染8、24、72、96、144、216 h后显著高于对照组;JA-Ile含量在TZSV侵染24、48、72、96、144、216 h后显著高于对照组。TZSV侵染可使辣椒SA、JA及其衍生物JA-Ile含量增加。
关键词： 番茄环纹斑点病毒 辣椒 茉莉酸 水杨酸 茉莉酸-异亮氨酸
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番茄环纹斑点病毒(TZSV)实时荧光定量PCR检测方法的建立
《山东农业科学 》 2017
摘要：本研究根据番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)保守N基因(Gen Bank登录号:13YV639)设计一对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,构建了TZSV的SYBR Green RT-qPCR检测方法。该方法稳定可靠,组内和组间的变异系数都小于2%;标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.39和0.996,扩增效率为97.44%;最低能检测到1.07×10~4copies/μL的阳性质粒,灵敏度为常规PCR的1 000倍。同时利用构建的RT-qPCR方法检测TSWV、TNSa V、PCSV和TZSV四种病毒,只有TZSV有特异扩增曲线,表明该方法特异性良好。本研究构建的RT-qPCR方法能够为TZSV的早期预警与动态监测提供可靠的技术支撑。
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单头西花蓟马总RNA提取方法的比较研究
《山东农业科学 》 2017
摘要：Tri Pure法和RNA提取试剂盒法是目前实验室动植物RNA提取的常用方法。本试验通过对两种不同的RNA提取试剂盒与Tri Pure法进行比较,发现Trans公司研发的型号为ER501-01的Trans Zol Up Plus RNA Kit试剂盒适合提取单头西花蓟马总RNA,所得到的RNA纯度和浓度都比较高。该研究结果为通过分子手段研究蓟马等小型昆虫提供理论基础。
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