科研产出
民族药青叶胆EST-SSR反应体系建立及引物筛选
《时珍国医国药 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：目的采用EST-SSR标记遗传多样性能研究。方法以青叶胆叶片为材料,采用改良CTAB法提取DNA,通过单因素筛选法及L16(45)正交试验对模板DNA、d NTPs、引物、Taq酶及Mg~(2+) 5个因素进行优化试验。结果最佳反应体系为(20μl):50 ng模板DNA,150μmol/L d NTPs,0.1μmol/L引物,1.5 U Taq酶,2.5μmol/L Mg2+。从52对引物中初步筛选出10对条带清晰、多态性好的引物。结论本实验获得的优化体系能稳定用于青叶胆EST-SSR分子标记,为遗传多样性、亲缘关系分析及遗传作图等研究工作奠定了重要基础。
关键词： 青叶胆 EST-SSR 正交设计 体系优化 引物筛选
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滑叶藤ISSR-PCR反应体系建立及优化
《云南农业大学学报(自然科学) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为建立和优化滑叶藤ISSR-PCR反应体系,运用正交试验和单因子试验分析模板DNA,TagDNA聚合酶,Primer,Mg2+和dNTPs 5个因子对滑叶藤ISSR-PCR反应影响。结果表明了滑叶藤ISSR-PCR 25μL反应体系中5个因子最佳水平:DNA模板为8.4 ng,TagDNA聚合酶为2.0 u,Primer浓度为0.8 mmol/L,dNTPs浓度为0.68 mmol/L,Mg2+浓度为2.4 mmol/L。该反应体系为利用ISSR分子标记技术研究铁线莲属植物提供了可靠方法。
关键词： 滑叶藤 ISSR-PCR反应 体系优化
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