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民族药青叶胆EST-SSR反应体系建立及引物筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 王美蓉 1 ; 王元忠 1 ; 黄衡宇 1 ;

作者机构： 1.云南中医学院中药材优良种苗繁育工程研究中心;云南省农业科学院药用植物研究所

关键词： 青叶胆;EST-SSR;正交设计;体系优化;引物筛选

期刊名称： 时珍国医国药

ISSN： 1008-0805

年卷期： 2016 年 11 期

页码： 2802-2805

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的采用EST-SSR标记遗传多样性能研究。方法以青叶胆叶片为材料,采用改良CTAB法提取DNA,通过单因素筛选法及L16(45)正交试验对模板DNA、d NTPs、引物、Taq酶及Mg~(2+) 5个因素进行优化试验。结果最佳反应体系为(20μl):50 ng模板DNA,150μmol/L d NTPs,0.1μmol/L引物,1.5 U Taq酶,2.5μmol/L Mg2+。从52对引物中初步筛选出10对条带清晰、多态性好的引物。结论本实验获得的优化体系能稳定用于青叶胆EST-SSR分子标记,为遗传多样性、亲缘关系分析及遗传作图等研究工作奠定了重要基础。

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