科研产出
青蒿中番茄斑萎病毒和烟草花叶病毒的分子鉴定及相关序列分析
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要:番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)是2种重要的植物病原病毒,对多种经济作物的产量和品质均造成严重影响。2021年-2022年,在云南省丽江市烟草种植区不同烟区采集叶片黄化、皱缩以及无症状的青蒿Artemisia caruifolia样品共计14份,利用免疫金标速测卡和RT-PCR对其病原病毒进行检测。利用免疫金标速测卡检测结果显示,在所检样品中有9份样品检测出TSWV,检出率为64.28%,有3份样品检测出TMV,检出率为21.43%,2种病毒复合侵染的检出率同样为21.43%;利用RT-PCR对复合侵染的3份样品进行分子检测,结果显示,在3份复合侵染青蒿样品中获得3条TSWV N基因序列、3条TMV cp基因序列和2条TMV RdRp部分序列。TSWV青蒿分离物与分离自云南的TSWV-2分离物相似性最高,为99.6%;TMV青蒿分离物与分离自辽宁的TMV-Shenyang分离物和分离自云南的TMV-Yongren-1相似性最高,均大于99.4%。这是首次发现TSWV和TMV 2种不同属病毒复合侵染青蒿。
长梗喉毛花中3种化合物抗烟草花叶病毒活性分析及其对4种防御酶活性的影响
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:[目的]评价从长梗喉毛花[Comastoma pedunlulatum(Royle ex D.Don)Holub]中分离得到的3种化合物的抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)活性及其对烟草4种防御酶活性的影响,为研发有效防治TMV的植物源农药提供先导化合物和理论依据.[方法]以心叶烟为试验材料,设化合物处理(当药黄素、高杯喉毛花内酯A和异荭草素)、空白对照(CK)和药剂对照(8%宁南霉素)处理,采用半叶枯斑法测定化合物对TMV侵染的预防保护和钝化作用;以普通烟草栽培品种K326为试验材料,设对照[空白对照(CK)和接种对照(CK+TMV)]、宁南霉素[药剂对照(PC)]、当药黄素、高杯喉毛花内酯A和异荭草素处理,利用防御酶检测试剂盒测定各处理烟草叶片中多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性.每处理3次重复.[结果]先施用被试物后接种TMV时,当药黄素、高杯喉毛花内酯A 和异荭草素在100 μg/mL时均减少TMV在心叶烟上的枯斑数目,对TMV的抑制率分别为50.05%、57.55%和61.73%,均对TMV侵染均具有一定的预防保护作用,而对照药剂宁南霉素对TMV的抑制率只为47.75%.TMV与被试物溶液混合接种心叶烟时,当药黄素和高杯喉毛花内酯A 对TMV的抑制率分别为51.65%和45.66%,对TMV侵染有较好的钝化作用.分别施用当药黄素、高杯喉毛花内酯A和异荭草素后,烟草叶片防御酶PPO活性分别在24、12和24 h后达最大值;PAL活性均在72 h时达最大值;POD活性分别在24、48和72 h后达最大值.PPO、PAL和POD活性在最大值时与CK均呈显著差异(P<0.05),而SOD活性在最大值时与CK无显著差异(P>0.05).[结论]分离自长梗喉毛花的3种化合物当药黄素、高杯喉毛花内酯A和异荭草素使用浓度为100 μg/mL时对TMV均有较好的预防保护活性,具有作为抗TMV植物源农药或先导化合物的潜力.
关键词: 长梗喉毛花 黄酮类 裂环环烯醚萜苷类 烟草花叶病毒 防御酶活性
11种植物提取物抗烟草花叶病毒活性研究
《西南林业大学学报(自然科学) 》 2017 北大核心
摘要:为开发环境友好型的植物源抗病毒剂,以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,采用半叶枯斑法,研究了11种植物不同溶剂提取物的抗TMV活性。结果表明:当浓度为1 mg/m L时,臭灵丹石油醚提取物、红花月见草乙酸乙酯提取物、臭灵丹水层提取物对TMV增殖有显著抑制(P<0.05)活性抑制率分别为68.47%、80.19%、94.57%;臭灵丹石油醚提取物、钻叶紫菀乙酸乙酯提取物、臭灵丹水提取物对TMV有较强的钝化活性,抑制率分别为80.00%、76.38%、83.33%。TAS-ELISA检测表明,臭灵丹、风轮草、珊瑚樱、钻叶紫菀、益母草、拔毒散等植物提取物对普通烟K326内病毒增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并且明显好于阳性对照药剂宁南霉素。
关键词: 烟草花叶病毒 抗TMV活性 半叶枯斑法 叶圆片法 检测
微生物菌组合对烟叶病残体的消毒效应研究
《云南农业大学学报(自然科学) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:为探索田间废弃鲜烟叶的处理途径,实现烤烟田间清洁生产,研究了采用微生物菌组合对携带烟草花叶病毒(TMV)的烟叶病残体进行发酵处理的技术。该技术的处理效果用ELISA检测、枯斑检测和烟苗浇根试验进行检验。结果表明,在含有TMV的废弃鲜烟叶发酵处理中,添加"乳酸菌+光合细菌+放线菌+地衣芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌+胶质芽孢杆菌"的微生物菌组合,不仅能够有效地降解或破坏烟叶病残体中的TMV,抑制TMV的侵染活性,还对烟株生长发育有一定的促进作用,这对田间废弃鲜烟叶处理具有重要的参考价值。
烟草花叶病毒原核表达外壳蛋白抗体制备及快速检测方法建立
《西南农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:用RT-PCR从感染烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的烟草样品中克隆该病毒的外壳蛋白基因,病毒外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,构建成重组原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导、Ni+NTA亲和柱纯化获重组蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔,制备TMV外壳蛋白多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了更简便、经济、特异性更强的DOT-ELISA检测法。
关键词: 烟草花叶病毒 原核表达 多克隆抗体 DOT-ELISA
云南烟草中烟草花叶病毒株系比较与分析
《中国烟草学报 》 2013 CSCD
摘要:利用TAS-ELISA方法对采自云南不同烟草种植区的710份花叶病样进行检测,其中546份样品与TMV抗体呈阳性反应。根据地理分布的差异,选择了38个代表性分离物进行TMV外壳蛋白基因的IC-RT-PCR扩增、克隆和测序。测序分析表明,38个TMV cp基因核苷酸序列相似性在95%~100%之间,其推导的氨基酸序列同源性为97.5%~100%。云南不同TMV分离物与TMV-U1、TMV-Fujian核苷酸相似性大于90%,其系统关系与TMV-U1和TMV-Fujian分离物聚为一簇,研究表明云南38个烟草分离物均属于TMV-U1株系。
植物源天然产物AHO对烟草花叶病毒的田间防效
《中国植保导刊 》 2013 北大核心
摘要:选用植物源天然产物AHO(3-丙酮基-3-羟基羟吲哚)在烟草漂浮育苗苗期和大田期对烟草花叶病毒(TMV)进行了连续防控试验。结果表明:AHO在烟草苗期和大田期对TMV均有较好的防效,在大田期的平均防效达43.6%,优于其他3种作为对照的生物源农药。
2种不同类型病毒抑制剂防控TMV的田间药效比较
《河南农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为评价不同类型病毒抑制剂在不同发病条件下对烟草花叶病的防控效果,选用2种生物制剂(AHO、宁南霉素)和2种化学农药(吗胍.乙酸铜、烯.羟.硫酸铜)进行田间药效试验。大田接种烟草花叶病毒(TMV)的试验表明,AHO和吗胍.乙酸铜对TMV的平均防效较高,分别为41.8%和39.8%,宁南霉素和烯.羟.硫酸铜对TMV的平均防效较低,分别为25.4%和14.5%;在自然发病状态下,AHO对TMV的平均防效为45.5%,宁南霉素的平均防效次之,为36.6%,而烯.羟.硫酸铜和吗胍.乙酸铜的平均防效则分别为28.7%和16.2%。AHO在不同带毒环境下防控烟草花叶病的效果都优于其他3种市售药物,表明其具有开发成为绿色抗烟草花叶病新型农药的潜力。
关键词: 烟草花叶病毒 病毒抑制剂 生物农药 药效试验 防效
烟株不同叶位及接种方式对TMV传播的影响
《西南师范大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为进一步弄清烟草普通花叶病毒病的传毒规律.试验以烟草品种K326为材料,连续3a以不同接种方式对健康烟株进行TMV接种试验.结果表明:烟草普通花叶病不通过烟叶气孔传毒,而是通过微伤口、大伤口和叶面与叶面接触渠道传播病毒,而且病毒入口离生长中心越近,病毒传播表现的速度更快,病毒的潜伏期为15~30d,且在接种30~45d内,烟叶的发病率有一高峰值;烟草普通花叶病毒在烟株的幼嫩叶片上更易传播,症状表现在接种以上的叶片上,带病症的老叶片随着烟株的生长,症状会慢慢消失;在20~35℃的范围内,高温高湿有利于病毒的侵染和症状的表现.杜绝烟草幼嫩叶片摩擦伤口和TMV接触,是防治烟株上TMV传播的有效途径.