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烟草花叶病毒原核表达外壳蛋白抗体制备及快速检测方法建立

文献类型： 中文期刊

作者： 卢训 1 ; 方琦 1 ; 尹跃艳 1 ; 秦西云 2 ; 丁铭 1 ;

作者机构： 1.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

2.云南省烟草农业科学研究院

关键词： 烟草花叶病毒;原核表达;多克隆抗体;DOT-ELISA

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2014 年 27 卷 04 期

页码： 1547-1550

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR从感染烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的烟草样品中克隆该病毒的外壳蛋白基因,病毒外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,构建成重组原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导、Ni+NTA亲和柱纯化获重组蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔,制备TMV外壳蛋白多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了更简便、经济、特异性更强的DOT-ELISA检测法。

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