百合鳞片DNA提取及RGA-PCR体系的优化

杨秀梅; 瞿素萍; 王丽花; 崔光芬; 彭绿春; 王继华; 《西南农业学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：以百合鳞片为材料,采用改良的CTAB法获得了高质量的基因组DNA。通过影响PCR反应各因子的优化,建立了适合百合的RGA-PCR反应体系:25μl体系中含30 ng模板DNA、2.5 mmol/L MgCl2、0.2 mmol/L dNTPs、0.6μmol/L引物及1.5 UTaq酶。扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,44℃退火1 min,72℃延伸2 min,40个循环;最后72℃延伸7 min。利用该体系对35个百合品种进行RGA-PCR,表明该反应体系具有较好的稳定性和可靠性。

关键词： 百合 DNA提取 RGA-PCR