科研产出
云南龙陵地区产紫皮石斛和铁皮石斛中9种功能活性物质测定及鉴别研究
《现代食品 》 2023
摘要：建立了超声冰浴辅助提取,超高效液相色谱-串联质谱法同时测定紫皮石斛和铁皮石斛中9种活性化合物的分析方法.本方法快速简便、灵敏度高,样品经甲醇-水溶液冰浴下超声提取后,采用超高效液相色谱-串联质谱多反应监测模式正负离子同时扫描进行测定.该方法在 0.001~10.000 μg·mL-1 线性关系较好,定量限为0.025~0.250 mg·kg-1,平均加标回收率为 70.4%~79.2%,相对标准偏差为 4.27%~7.48%.PCA分析结果表明产自相同地区的紫皮石斛和铁皮石斛能够被有效鉴别.柚皮苷、芹菜素、圣草酚、香草酸和紫丁香苷特征活性化合物在紫皮石斛和铁皮石斛中的含量差异较大(P<0.01),且VIP值都大于1.柚皮苷在紫皮石斛中有检出,但在铁皮石斛中未检出,可以作为鉴别紫皮石斛和铁皮石斛的关键特征指标.
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家蚕BmNPV压力选择品系的细菌病发生及其病原分离鉴定
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】调查鉴定核型多角体病毒（BmNPV）压力选择家蚕相关品系细菌病发病原因，为蚕作生产上家蚕抗Bm NPV品种细菌病防治提供理论依据。【方法】相同批次和饲养条件下，对BmNPV压力选择自建品系P50Nn（n表示代）和抗Bm NPV品种4个母种品系苏N、菊N、明N、虎N的正常保种组发生家蚕细菌病情况进行初步调查，分离培养病蚕肠道细菌，开展16S rDNA分子鉴定、革兰氏染色和扫描电镜等形态学鉴定，以及糖发酵、吲哚试验等20项生化鉴定。【结果】细菌病导致家蚕BmNPV压力选择品系添食BmNPV第3代次的P50N3结茧率为47.63%，抗BmNPV育种母种品系添食BmNPV多代次的菊N结茧率最低为34.72%，而未添食过BmNPV的对照品系P50结茧率为96.15%,P50N3和菊N结茧率与P50呈极显著差异（P＜0.01）。病蚕肠道细菌经过多次分离纯化，显微镜观察球状细菌较多；分子鉴定后获得肠球菌属（Enterococcus）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、沙雷氏菌属（Serratia）、克雷伯氏菌属（Klebsiella）、假单胞菌属（Pseudomonas）和肠杆菌属（Enterobacter）等7类细菌属，其中葡萄球菌属占比（30.00%）最高，其次为肠球菌属和沙雷氏菌属，均为16.67%。选择分子鉴定一致性最高的8株不同细菌，进一步进行形态学鉴定和生化鉴定，与分子鉴定结果一致。【结论】家蚕BmNPV压力选择品系的细菌病发生主要由葡萄球菌、肠球菌和多种肠杆菌科细菌引起，在BmNPV压力选择早期家蚕细菌病发生更严重。
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中国半夏主产地软腐病致病菌分离、鉴定及比较研究
《西南农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确中国半夏主产区软腐病病原菌种类及其致病力强弱,为半夏生产和病害防控提供理论依据.[方法]对全国半夏主产区软腐病危害情况进行调查,根据柯赫氏法则对全国半夏主产区软腐病病原菌进行分离、鉴定、致病性检测以及生物学特性研究,并通过离体叶片和离体块茎回接对分离鉴定得到的3种软腐病优势病原菌进行致病力比较分析,采用抑菌圈法对3种软腐病优势致病菌进行室内药剂筛选.[结果]中国半夏软腐病主要由果胶杆菌属(Pectobacterium)的胡萝卜软腐果胶杆菌(P.carotovorum,P.aroidearum)以及狄克氏菌属(Dickeya)的 D.fangzhongdai 引起,其中 P.carotovorum 和 P.aroidearum 分布较广,在全国4个半夏主产区中均可检测到,而D.fangzhongdai仅存在于湖北天门半夏产区.菌株致病力强弱为P.carotovorum>D.fangzhongdai>P.aroidearum,且 P.carotovorum、D.fangzhongdai 和 P.aroidearum 更容易从半夏叶片背面进行侵染.在不同条件下培养3种软腐病菌株,结果表明最适生长温度为28~30℃,最适pH为8.0.室内药剂筛选结果表明,26种不同类型杀菌剂中化学杀菌剂噻霉酮、二氯异氰尿酸钠和植物源杀菌剂乙蒜素对3种半夏软腐病优势致病菌株有显著抑制效果,EC50值均小于50μg/mL.[结论]半夏软腐病主要致病菌有P.carotovorum、P.aroidearumn和D.fan.gzhongdai,且P.carotovorum菌株致病力最强,噻霉酮、二氯异氰尿酸钠和乙蒜素对3种半夏软腐病有显著抑制效果.
关键词： 半夏 软腐病 病害调查 病原鉴定 致病力比较 药剂筛选
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一株蔗渣纤维素降解细菌的筛选与鉴定
《昆明学院学报 》 2023
摘要：制糖业是云南的主要产业之一，每年会产生大量的蔗渣.为了能有效地处理云南制糖业产生的蔗渣，并对其进行再次利用，研究团队从云南省昆明市筇竹寺森林公园采集土壤样品，分别用CMC刚果红培养基和以蔗渣作为唯一碳源的蔗渣培养基进行纤维素分解细菌的筛选，通过测定其在2种培养基上形成的水解透明圈和菌落直径的比值进行分析，再结合纤维素酶活力变化特征筛选获得一株能高效分解利用蔗渣纤维素的细菌QZS-1.该菌株整体为乳白色，边缘呈不规则锯齿状，上有花纹.经过革兰氏染色和芽孢染色确定为革兰氏阳性的芽孢杆菌.同源性比对显示，其与短小芽孢杆菌同源性达99.91%,最终鉴定为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,在72 h时产酶活力达到最高，为17.217 U/mL.
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光叶苕子(Vicia villosa var.)内生细菌Sz-2的特性及其对香蕉枯萎病的防治效果
《植物营养与肥料学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]从云南绿肥主推品种光叶紫花苕根内筛选出对香蕉具有促生和拮抗作用的菌株,并对其特性和香蕉枯萎病的防治效果进行研究,以丰富生防促生菌株资源库.[方法]从光叶紫花苕根中筛选出高效拮抗菌株Sz-2,使用平板对峙试验测定菌株抑菌效果;并测定其体外解磷、解钾、固氮及产铁载体能力;通过形态学观察、生理生化测定和 16S rDNA序列分析,对该菌株进行了分类鉴定.布置盆栽试验,设 4 个处理:无抗生菌对照和接种病原菌TR4、Sz-2+TR4、Sz-2,测定香蕉叶片和球茎的发病指数以及促生效果.[结果]光叶紫花苕根内分离得到的菌株Sz-2 对香蕉枯萎病菌具有较好的拮抗效果,平板径向抑菌率达 74.3%.菌株Sz-2 为革兰氏阴性细菌,菌落形态呈浅白色、放射状,接触酶、氧化酶、赖氨酸脱羧酶、β-半乳糖苷酶、精氨酸双水解酶、明胶水解、硝酸还原反应、纤维二糖、柠檬酸反应、葡萄糖发酵反应、酪素水解等均为阳性,吲哚反应、淀粉水解、产H2S反应、鸟氨酸脱羧酶、脲酶反应为阴性.结合形态学和分子生物学鉴定菌株Sz-2 为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia).盆栽结果显示,接种拮抗菌Sz-2 后的香蕉球茎和叶片枯萎病发生较轻,球茎纵切面和叶片颜色正常且植株生长健康,对球茎和叶片的防效达 69.66%和 84.60%;香蕉茎粗、单株鲜重和株高与CK相比分别提高了 6.01 mm、83.3 g和 11.82 cm.[结论]菌株Sz-2 对香蕉枯萎病具有较好的防治作用,加之其解磷、解钾和产铁载体功能,对香蕉植株具有显著的促生效果,可结合绿肥研制具有防控香蕉枯萎病的功能型绿肥,为香蕉促生抗病菌株的进一步田间开发应用提供理论依据
关键词： 光叶苕子 香蕉枯萎病 内生菌 分离鉴定 抑菌效果 嗜麦芽寡养单胞菌
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土壤真菌Aspergillus fumigatus固体发酵产物的化学成分及抗氧化活性研究
《天然产物研究与开发 》 2022 CSCD
摘要：为研究来源于哀牢山国家级自然保护区河谷的土壤真菌Aspergillus fumigatus固体发酵产物的化学成分及抗氧化活性研究,采用正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和Sephadex LH-20分离纯化,借助核磁共振波谱等方法鉴定化合物结构,从中共得到13个化合物,分别鉴定为rubrofusarin B(1)、rubrofusarin A(2)、carbonarone A(3)、aspernigrin A(4)、flavasperone(5)、(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(6)、(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇(7)、ourosperone A(8)、(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(9)、stigmast-1,5-dien-3β-ol(10)、fonsecinones A(11)、asperpyrone C(12)、asperpyrones B(13)。其中,化合物1～5和7～13为从该菌种中首次分离。抗氧化活性结果显示,化合物8对DPPH(IC50=3.453 mg/mL)、ABTS+(IC50=0.155 mg/mL)、OH(IC50=0.019mg/mL)自由基都有一定的清除效果。
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德国鸢尾茎基腐病病原菌鉴定及生物学特性分析
《植物保护学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为明确德国鸢尾Iris germanica茎基腐病病原菌及其生物学特性,利用组织分离法对采自云南省的感茎基腐病德国鸢尾样品进行分离和纯化,通过形态学特征和ITS、TUB2、EF-1α多基因序列分析对其进行鉴定,采用室内离体和活体接种法测定其致病性,并研究其生物学特性.结果表明,从25份发病德国鸢尾植株样本中分离得到15株菌株,依据形态学特征和显微观察,发现其中6株菌株形态特征一致,另外9株菌株形态特征一致,从中各选1株代表菌株YWMZ1、YWJB3进行接种后出现叶片萎蔫,茎基部腐烂,发病症状与田间一致.经形态学特征观察、多基因序列分析、致病性测定最终将代表菌株YWMZ1鉴定为木贼镰刀菌Fusarium equiseti,菌株YWJB3鉴定为尖孢镰刀菌F.oxysporum.2株菌株菌丝最适培养温度均为25℃;菌株YWMZ1和YWJB3最适pH分别为5和7;2株菌株在5种碳源和氮源上均可生长,其中菌株YWMZ1最适碳源为可溶性淀粉,YWJB3最适碳源为蔗糖,2株菌株均以硝酸钾为最适氮源;菌株YWMZ1和YWJB3最适光照条件分别为连续光照和12 h明暗交替.
关键词： 德国鸢尾 茎基腐病 病原菌鉴定 镰刀菌 生物学特性
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云南月季根癌病的病原菌鉴定及生物防治技术研究
《江西农业学报 》 2022
摘要：为明确云南月季根癌病的致病菌种类,以月季种苗植株上着生的病瘤组织为材料,经DNA提取及PCR特异性扩增,采用基于Ti基因的系统发育进行分子生物学鉴定,并在此基础上对发病植株施用不同生防菌剂开展药效试验.结果表明,由病瘤组织提取的植物总DNA(编号为GA-8),通过特异性引物VCF1-2004/VCR2-2004进行PCR扩增,凝胶电泳后在约414 bp处获得清晰特异性条带,序列结果与GenBank中登录的A.tumefaciens Ti质粒vir毒区序列的同源性达98.92%以上.进一步采用MEGA软件构建系统发育树,GA-8与A.tumefaciens聚类在同一分支,进一步证实月季根癌病的致病菌为A.tumefaciens.生防药效试验中枯草芽孢杆菌300倍液的防效优于木霉菌剂及松脂酸铜,原病瘤体失活率为87.10%,新瘤抑制率为60%,新枝萌芽指数为1.13,植株存活率为90%.
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低纬高原甘蔗锈病病原菌鉴定及系统进化分析
《西南农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确低纬高原云南蔗区甘蔗锈病病原种类、发生分布特征、病原间及其与柄锈菌属其他锈菌的系统进化关系.[方法]通过症状观察,病原形态特征观察和分子检测对采自云南不同蔗区的57份锈病样品进行病原鉴定;并构建NJ树分析甘蔗锈病病原与其他柄锈菌的系统进化关系.[结果]云南勐海海引1号4份锈病样品的夏孢子堆桔黄色,夏孢子梨形,栗褐色或金黄色,表面有刺,壁顶端加厚10 μm,大小为(25~50)μm×(16~35)μm,具4~5个芽孔.核苷酸序列与已报道的屈恩柄锈菌(GU058021)同源性在99.9%以上,表明这些锈病样品是由屈恩柄锈菌引起的甘蔗黄锈病;其余53份锈病样品的夏孢子堆棕红色,夏孢子球形,棕色至深棕色,表面布满小刺,壁四周均匀加厚,大小为(20~40)μm×(13~25)μm,芽孔多4个;侧丝无色,匙形.核苷酸序列与已报道的黑顶柄锈菌(GU058001)同源性在99.8%以上,表明这些锈病样品都是由黑顶柄锈菌引起的甘蔗褐锈病.系统进化树显示,文章获得的4条屈恩柄锈菌与Puccinia polysora(GU058024)聚为1组,遗传关系近;53条黑顶柄锈菌与P.nakanishikii(GU058002)、P.rufipes(AJ296545)、Aecidium deutziae(KU309317)和 P.coronata(DQ354526)等柄锈菌属锈菌聚为 1组,遗传关系近;而2种甘蔗锈病菌的遗传关系相对较远.[结论]在低纬高原云南蔗区首次发现引起甘蔗黄锈病的屈恩柄锈菌,并证实引起褐锈病的黑顶柄锈菌是低纬高原甘蔗锈病的主要病原.
关键词： 甘蔗锈病 病原鉴定 黑顶柄锈菌 屈恩柄锈菌 系统进化
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