科研产出
云南金荞麦叶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性
《湖南农业大学学报(自然科学版) 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：从云南省嵩明县试验基地采集金荞麦叶斑病病叶，采用组织分离法分离培养病原菌，根据柯赫氏法则测定病原菌的致病性，观察病原菌形态学特征，并与ITS、TUB2系统发育分析相结合鉴定病原菌，测定病原菌的生物学特性。结果表明：云南金荞麦叶斑病病原菌代表菌株GY3的孢子形态与拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)真菌相似，菌株GY3的rDNA–ITS及TUB2联合序列与小孢拟盘多毛孢(P.microspora)2个菌株(ZK1–1、ZK5–5)的序列聚在同一分支，鉴定认为金荞麦叶斑病的病原菌为小孢拟盘多毛孢(P.microspora)；病原菌生物学特性测定结果表明，GY3菌丝生长最适培养基为PDA，以PDA培养基培养GY3，菌丝生长最适pH为7，最适温度为25℃，菌丝的致死温度为50℃(水浴10min)，连续光照最有利于菌丝生长，菌丝生长的最适的碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。
关键词： 金荞麦 叶斑病 病原菌鉴定 小孢拟盘多毛孢 生物学特性 云南
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云南白菜根肿病拮抗菌的筛选及鉴定
《西南农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]获得对云南白菜根肿病具有高效拮抗作用的微生物菌株,为云南白菜根肿病的生物防治提供潜在的菌种资源.[方法]从云南省曲靖市麒麟区三宝乡大棚白菜根肿病发病严重的地块,采集正常生长或发病较轻的白菜植株及其根际土壤,分离筛选抑菌效果较好的菌株,并对其进行形态特征鉴定、生理生化检测及分子序列分析.[结果]经初步筛选共获得46株细菌.土壤样品中共分离出30株细菌,其中抑制效果最好的是TB-7菌株,该菌株对白菜根肿病菌休眠孢子萌发抑制率为76.88%;白菜植株内共分离出16株内生细菌,其中抑制效果最好的是EB-15菌株,该菌株对白菜根肿病菌休眠孢子萌发抑制率为67.38%.通过对比分析选择抑菌效果最好的TB-7菌株作为目标菌株,经鉴定,TB-7菌株为革兰氏阳性芽孢杆菌,菌体菌落较小,颜色淡黄色,表面光滑且扁平,菌体湿润,不透明,边缘规则;生理生化指标检测结果显示,TB-7菌株是好氧菌,V-P、淀粉水解、pH 5.7,生长3项检测指标均呈阳性,柠檬酸盐、丙酸盐、D-木糖、L-阿拉伯糖、D-甘露醇、明胶液化、7%NaCl生长、硝酸盐还原8项检测指标均呈阴性;16S rDNA扩增产物约为1500 bp,测序结果表明,TB-7菌株与坚强芽孢杆菌(Cytobacillus firmus)同源性达到100%,鉴定该菌株为芽孢杆菌属的坚强芽孢杆菌.[结论]通过初步筛选及鉴定,获得1株对白菜根肿病菌休眠孢子抑制率达到76.88%的拮抗菌株,该菌株的获得可为解决云南本地日益严重的白菜根肿病的生物防治奠定基础.
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“一带一路”背景下老挝西瓜产业现状及发展对策
《中国蔬菜 》 2024 北大核心
摘要：老挝西瓜产业依托中国生产技术和中国市场而发展,是"一带一路"背景下,中国与东盟农业合作的代表.老挝气候利于早春西瓜栽培,能较好填补中国早春西瓜供应缺口;老挝西瓜生产总成本较中国类似气候地区如海南低1200~2600元·(667 m2)-1,中老铁路的通车也为老挝西瓜运输降低了成本,缩短运输时间;老挝西瓜生产同时也存在栽培技术落后、西甜瓜产业园区较少等问题,随着中国包括人才、良种良法、资金等资源的涌入,以及"一带一路"通道建设不断向中下寮平原区发展,将建立起完善的西瓜产业链,推动老挝西瓜产业.
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三株无量山森林土壤芽孢杆菌鉴定及其生物活性挖掘
《生物技术通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]挖掘无量山国家自然保护区潜在的高活性微生物菌株,旨在为农业绿色投入品研发提供高效的菌种资源.[方法]以番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum)为靶标筛选高拮抗活性菌株,观察对菌丝生长的影响,测定对孢子萌发的抑制作用;检测脂肽类化合物合成基因以及菌株体外产酶、解磷、解钾、固氮及产铁载体能力;结合形态学、生理生化特征和 16S rRNA、gyrA、rpoB基因进行菌株鉴定,室内盆栽试验验证防病和促生效果.[结果]分离筛选获得 153 株可培养细菌,其中,菌株SH-53、N4471 和N9456 抑菌效果分别为 92.35%、87.29%和 88.47%,能抑制病原菌菌丝生长和分生孢子萌发,且对多种病原菌表现出良好拮抗活性.3 株功能菌均具有溶锌、产淀粉酶和蛋白酶的能力,菌株SH-53 和N4471 还具有解磷、固氮、分泌纤维素酶以及产铁载体能力.3 个功能菌基因组中均含有srfA、fenA、ituA、ituC、ituD、bymC等脂肽类化合物合成基因.经鉴定菌株SH-53 为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),N4471 为卡式芽孢杆菌(B.cabrialesii),N9456 为暹罗芽孢杆菌(B.siamensis).盆栽试验结果表明,3 株功能菌防效分别为 84.66%、54.96%和 59.74%,对番茄幼苗的株高、茎粗、根长等农艺性状均具有较好促进作用.[结论]3 个菌株具有高效、广谱的抑菌活性,具有多样化的生物活性,作为高效的微生物资源具有广阔的应用前景.
关键词： 解淀粉芽孢杆菌 卡式芽孢杆菌 暹罗芽孢杆菌 鉴定 生物活性 番茄枯萎病 促生
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云南不同蚕区僵蚕致病菌株的分离鉴定及致病力差异研究
《西南农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】了解云南省不同蚕区家蚕僵蚕病原的多样性及不同来源白僵菌菌株对家蚕的致病力差异。【方法】从云南省9个县（市）收集僵蚕样品，分离纯化获得病原菌，通过观察菌株的形态特征、产孢结构，并结合菌株核糖体rDNA-ITS序列的系统发育分析，确认病原种类。同时测定分析不同地理来源以及不同孢子浓度的球孢白僵菌菌株对家蚕致病力的影响。【结果】形态学和ITS序列分析发现，云南蚕区僵病病原菌属于白僵菌属（Beauveria）、虫草菌属（Cordyceps）和绿僵菌属（Metarhizium）,其中以球孢白僵菌（Beauveria bassiana）和莱氏绿僵菌（Metarhizium rileyi）为主要病原，分别占57.58%和30.30%。不同地理来源的球孢白僵菌株对家蚕幼虫的致病力存在一定差异，供试菌株侵染后，家蚕的僵蚕率在72.5%～95.0%,半致死时间(LT50)在5.093～7.133 d,其中LL1-1菌株的僵蚕率最高（95.0%）,半致死时间最短（5.093 d）,致病力最强；CB1-2菌株的僵蚕率较低（75.0%）,半致死时间最长（7.133 d）,致病力最弱。随着接种浓度的增加，病原的致病力变强，家蚕的僵蚕率也升高。【结论】云南省蚕区家蚕僵病病原种类呈多样性，球孢白僵菌和莱氏绿僵菌为主要病原菌，不同来源的白僵菌株对家蚕的致病力存在差异，本研究结果可为家蚕僵病的防治和僵蚕的生产提供参考依据。
关键词： 家蚕 僵病 分离鉴定 rDNA-ITS序列分析 致病力
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美国引进甘蔗热带种的ARMS PCR真实性鉴定
《中国糖料 》 2023
摘要：甘蔗遗传基础狭窄已经极大地阻碍了其育种进程,挖掘优异种质资源、创新亲本材料将成为未来甘蔗育种的重要方向之一.利用四引物扩增受阻突变PCR体系(ARMS PCR)对国家甘蔗种质资源圃保存的美国引进的 24 份疑似热带种材料进行真实性鉴定.PCR鉴定结果表明,供试材料中有'Green German'、'Black Fiji'、'Chittan'、'IN 84-072'和'NG 21-002'这 5份材料扩增带型与热带种'拔地拉'(Badila)一致,仅出现 428 bp的共有条带和 278 bp的热带种特有条带,属于热带种带型;而其它 19 份材料同时具有 278 bp的热带种特有条带和 203 bp的割手密特有条带,属于热带种与割手密的杂交种带型.经过上述分子鉴定得出结论,24 份美国引进的甘蔗种质中有'Green German'、'Black Fiji'、'Chittan'、'IN 84-072'和'NG 21-002'这 5 份材料为热带种材料,建议后续加强其农艺性状和抗性调查,并作为甘蔗热带种新血缘亲本进行杂交利用.
关键词： 甘蔗热带种 ARMS PCR 真实性 鉴定 甘蔗育种
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红外光谱结合化学计量学对栽培滇重楼的产地鉴别研究
《中草药 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：目的 比较滇重楼Paris polyphylla var. yunnanensis不同生长年限不同产地红外光谱特征，建立产地鉴别模型。方法 收集13个产地3～8年生栽培滇重楼样品，共计841株个体；通过衰减全反射-傅里叶变换红外光谱仪（attenuated total reflection-Fourier transform infrared spectra,ATR-FTIR）采集样品红外光谱；结合多元散射校正（multiplicative scattering correction,MSC）、一阶导数（first derivative,FD）、二阶导数（second derivative,SD）和三阶导数（third derivative,TD）筛选最佳光谱预处理方式；利用偏最小二乘判别模型（partial least squares discrimination analysis,PLS-DA）鉴别相同生长年限不同产地的样品。结果 三阶导数与多元散射校正结合是对3年生和5～8年生样品进行产地鉴别的最佳光谱预处理方式；二阶导数与多元散射校正结合是鉴别4年生不同产地样品最佳光谱预处理方法。变量投影重要性（Variable importance for the projection,VIP）分析显示，3700～1800 cm-1 在不同PLS-DA判别模型中均为贡献较大的变量波段；当剔除无关信息波段之后，PLS-DA模型能够准确鉴别相同年限不同产地滇重楼根茎样品，训练集和预测集鉴别准确率均为100%；置换检验结果显示模型鲁棒性较好。结论 研究建立的方法能够快速有效鉴别不同产地栽培滇重楼，为不同栽培年限滇重楼产地溯源提供理论基础与方法依据。
关键词： 滇重楼 红外光谱 偏最小二乘判别模型 生长年限 鉴别
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拟黏小奥德蘑的分离鉴定及生物学特性
《食用菌学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：在云南省昆明市石林彝族自治县圭山镇圭山国家森林公园采集得到野生小奥德蘑属（Oudemansiella sp.）标本，采用组织分离法获得纯培养菌株，并结合形态学和ITS序列分子系统发育分析进行物种鉴定，采用单因素结合正交实验分别对固体和液体培养条件进行筛选优化，采用袋料覆土栽培，在温度20～28℃、土壤湿度40%、空气湿度80%～90%的自然光照条件下的田间大棚开展驯化。结果表明：通过组织分离法获得纯培养菌株JF2004，将标本鉴定为拟黏小奥德蘑（O.submucida）；固体培养最佳条件为20.0 g·L-1果糖、16.0 g·L-1琼脂粉、2.0 g·L-1酵母膏、0.5 g·L-1碳酸钙、0.01 g·L-1维生素B1，温度26℃，pH 8.0；液体培养最佳条件为20.0 g·L-1可溶性淀粉、2.0 g·L-1酵母膏、0.5 g·L-1磷酸氢二钾、0.01 g·L-1维生素B1，温度28℃，pH5.0；接种后约23 d菌丝满袋，覆土后第24天子实体成熟，栽培子实体与野生子实体相比，菌盖直径较大、颜色较浅；野生子实体菌环明显，而栽培子实体菌环较小或无菌环；野生子实体菌柄基部颜色变深，而栽培子实体通体白色，菌柄没有颜色变化。
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肾茶叶枯病病原的分离与鉴定
《热带生物学报 》 2023
摘要：为了确定肾茶叶枯病致病病原菌，笔者从肾茶云南产区采集的肾茶叶枯病样本中分离到1株病原菌，并对其进行了病害症状观察，病原菌分离、鉴定和病原菌生物学特性研究。结果表明，其在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝发达，菌落初期下部淡粉色，后期为深黄棕色，分生孢子顶胞钩状，成熟的大型分生孢子有3～5个隔膜。将病原菌离体接种到健康肾茶叶片，保湿培养数天后接种部位出现黑褐色病斑，与田间症状一致。病原菌基因组DNA经真菌rDNA-ITS通用引物ITS1/ITS4扩增及同源性分析，病原菌与Fusarium nematophilum,Fusarium equiseti,Fusarium chlamydosporum,Fusarium longipes聚为一支，核酸序列同源性为99.40%～99.60%。结合形态特征观察、ITS序列分析及柯赫氏法则验证结果，初步确定该病原菌为镰刀菌。
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