《西南农业学报
》
2003
CSCD
摘要:利用农杆菌介导的转化方法对1个籼稻品种和3个粳稻品种进行了转化。所用质粒为pCAMBI1300,其上带有马铃薯蛋白酶抑制剂基因PinⅡ和高效启动子ACTⅠ以及调节子Intron。通过添加有利于转化的物质乙酰丁香酮及影响转化的各因素(农杆菌的培养方法、共培养天数、愈伤组织诱导方法及继代次数)进行综合优化后,建立了农杆菌介导的水稻高效转化体系。将成熟胚用pCAMBI1300/LBA4404浸染后,筛选出抗性愈伤组织并获得转化植株。其中抗性愈伤组织产生率最高达51 8%(粳稻)和31 5%(籼稻),转化植株再生率最高达67 6%(粳稻)和47 5%(籼稻)。初筛苗中PCR阳性苗得率最高达33 3%(粳稻)和27 4%(籼稻)。PCR结果初步表明PinⅡ基因已整合到水稻基因组中。田间抗虫试验初步表明,阳性苗虫害率低于其受体亲本虫害率。本研究还在转基因水稻中发现了性状明显变异的植株,是进行水稻遗传背景分析和优良性状利用的宝贵材料。
关键词:
水稻
根癌农杆菌
遗传转化
PinⅡ
转基因植株
《西南农业学报
》
2001
CSCD
摘要:利用农杆菌共培养法将雄性不育基因 (TA2 9 Barnase)导入水稻品种日本晴的胚性愈伤。通过 50~ 150mg/L卡那霉素筛选 ,从 50 0个胚性愈伤中获得 16个筛选愈伤团 ,并分化出了3株绿苗。经PCR扩增分析 ,16个筛选愈伤团中有 7个呈阳性 ;3株绿苗全部呈阳性
关键词:
农杆菌
胚性愈伤
Barnase基因
转基因水稻
共培养
《西南农业学报
》
2000
CSCD
摘要:利用电脉冲法将重组质粒PBI121/α—PAP导入农杆菌LBA4404,获得 3.5×106转化子/μ g质粒 DNA的转化效率。探讨了不同电激条件及农杆菌细胞生 长状态对转化率的影响。结果表明,农杆菌LBA4404电脉冲转化的最适电激条件 为电场强度 18kv/cm,电容 25μF,电阻 200Ω;农杆菌最适细胞生长状态为 OD600 =0.4~0.5。在一定范围DNA浓度与转化率成正比关系
关键词:
农杆菌
电脉冲
电激法
高效转化