科研产出
马铃薯prp1-1启动子的克隆及转基因研究
《西南农业学报 》 2002 CSCD
摘要：采用PCR技术 ,从云南马铃薯叶片DNA中分离克隆到了马铃薯病程相关蛋白 (prpl - 1)基因启动子 ,与国外文献报道序列完全一致。将这一启动子亚克隆到中间载体pUC18中 ,再构建到植物表达载体 pBI12 1上 ,以取代其原有的CaMV35S启动子 ,得到重组植物表达载体 pBI12 1M ;用电脉冲法将pBI12 1M转入农杆菌LBA4 40 4。应用农杆菌介导法 ,将携带有 pBI12 1M重组质粒的农杆菌转化烟草 ,经卡那霉素筛选 ,得到了一批转基因植株。转基因植株的PCR鉴定表明 ,启动子整合到了烟草植株基因组中。本研究为下一步通过X -Glu染色法检测启动子下GUS基因的表达情况 ,研究该启动子的病原菌特异性诱导活性 ,并建立新的植物转基因系统奠定了基础
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不同花色矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA克隆及序列分析
《云南植物研究 》 2002 北大核心 CSCD
摘要：以云南不同花色矮牵牛的花瓣为材料 ,提取总RNA ,用Oligo (dT)作为引物反转录合成cDNA第一链。以此为模板 ,用根据国外报道的矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA序列设计合成的引物进行PCR扩 ,均扩增到一条约 4 5 0bp的片段 ,分别克隆到pGEM -T载体上。对重组克隆进行序列分析 ,结果表明所克隆到的矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA的编码区均含有 4 4 7个核苷酸 ,编码 149个氨基酸残基 ,与国外报道的一致 ;但其核苷酸及氨基酸的序列与国外报道的有所不同 ,即与国外的相比 ,紫红色、蓝紫色矮牵牛中的该cDNA的核苷酸有 1个不同 ,而氨基酸完全相同 ;粉红色、白色矮牵牛中的有 3个核苷酸不同 ,并导致了2个氨基酸的不同。暗示该基因对花色的调控可能与其编码cDNA的一级结构有关。
关键词： 花色 矮牵牛 细胞色素b5蛋白(Cytb5) 基因克隆
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苦参凝集素蛋白基因的分离克隆(英文)
《植物学报 》 2001 SCI 北大核心 CSCD
摘要：自苦参 (SophoraflavescensAit.)块根中分离得到一种 32kD的凝集素蛋白 (SFL) ,其对兔血及人的 4种血型都具有很强的凝集活性 ,对棉花枯萎病菌 (FusariumvasinfectumAtk .)、小麦赤霉病菌 (Gibberellasaubinetii (Mont.)Sacc .)和水稻稻瘟病菌 (PiriculariaoryzaeCav .)的生长有明显抑制作用。依此凝集素蛋白N端部分氨基酸序列合成引物 ,通过 5′、3′_RACE技术 ,从苦参块根总RNA中克隆到了编码这一凝集素蛋白的全长cDNA序列 (已注册GenBank ,AF2 851 2 1 )。根据全长cDNA序列推导这一cDNA序列编码一个 2 84个氨基酸的前体蛋白 ,而分离得到的凝集素蛋白为一个 2 54个氨基酸残基的成熟蛋白 ,在其第 1 82位点含一个N糖基化位点N_L_S。
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