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百合抗镰刀菌资源鉴定及抗病相关基因筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 马璐琳 1 ; 张艺萍 1 ; 丁鲲 2 ; 吴丽芳 1 ; 王祥宁 1 ; 崔光芬 1 ; 贾文杰 1 ; 段青 1 ; 王继华 1 ;

作者机构: 1.云南省农业科学院花卉研究所

2.云南省农村科技服务中心

关键词: 百合大花卷丹;百合尖孢镰刀菌;SSH文库;基因表达分析

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2012 年 39 卷 06 期

页码: 1141-1150

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 对20个百合种质资源的组培苗进行尖孢镰刀菌百合专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lilii)室内接种鉴定;以筛选出有较好抗性的大花卷丹(Lilium leichtlinii var.maximowivzii Baker)为材料,以镰刀菌诱导12和24 h的作为处理组,无菌水处理作为对照组,采用SMART技术构建了百合经镰刀菌诱导后的抑制差减正、反向两个SSH文库。在正向文库中选择了4个抗病相关的ESTs,用半定量RT-PCR分析这些ESTs的表达情况。经接种鉴定,20个百合种质资源中,对百合镰刀菌表现高抗的有3个,中抗9个,感病8个;SSH文库ESTs片段大小为200~2 000 bp。依据斑点杂交结果,从正向SSH文库中挑取50个单克隆进行测序和比对分析,得到6种共10条抗病相关EST。通过半定量RT-PCR对其中的4条抗病相关ESTs:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,S/TPK)、谷胱甘肽S–转移酶(glutathione S-transferase,GST)、过氧化物酶(peroxidase,POD)和亲环素(cyclophilin,CYP)的表达情况进行了分析,证明它们在一定程度上都受百合镰刀菌诱导而表现上调表达,推测其可能参与了百合对镰刀菌枯萎病的抗病过程。

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